盐酸戊乙奎醚对大鼠肺血管内皮细胞血管生成的影响

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目的:通过探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠肺微血管内皮细胞增殖,粘附,迁移,成管的影响,以及对细胞磷酸化Akt的影响,来研究盐酸戊乙奎醚对血管生成的影响及作用机制。方法:将培养的肺微血管内皮细胞分别用不同浓度的盐酸戊乙奎醚进行处理。通过Matrigel胶测定细胞成管和细胞粘附。通过MTT和自动细胞计数测定细胞增殖。通过细胞划痕实验测定细胞迁移。通过蛋白质印迹法测定盐酸戊乙醚对磷酸化Akt,磷酸化ERK,mTOR和RICTOR的影响。此外,测定不同浓度格隆溴铵和乙酰胆碱,以及磷酸化Akt的抑制剂LY294002和mTOR的抑制剂Torin-1对肺血管内皮细胞成管以及磷酸化Akt的影响。结果:1.盐酸戊乙奎醚在低浓度促进Akt的磷酸化,促进细胞迁移,从而促进血管生成,在高浓度抑制Akt的磷酸化,抑制细胞迁移,从而抑制血管生成。2.PI3K和mTOR的抑制剂阻断了盐酸戊乙奎醚促进的细胞成管和磷酸化Akt的表达。3.格隆溴铵以浓度依赖性方式抑制Akt的磷酸化从而抑制血管生成。4.乙酰胆碱以浓度依赖性方式促进Akt的磷酸化从而促进血管生成。结论:1.PI3K/Akt信号通路是肺微血管内皮细胞血管生成中的一个重要的信号通路。2.盐酸戊乙奎醚通过PI3K/Akt信号通路,在低浓度促进肺微血管内皮细胞血管生成,在高浓度抑制肺微血管内皮细胞的血管生成。
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