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在世界范围内，肿瘤发病率逐年增高。如何有效地治疗肿瘤也因此成为世界性的研究热点与难点。肿瘤的治疗之所以困难，一方面原因是肿瘤细胞恶性程度高、侵袭性强、容易转移及复发，另一方面的原因就是肿瘤患者自身的免疫功能受到损伤，导致其清除肿瘤细胞的能力下降。传统的治疗方法只关注肿瘤细胞本身，通过手术、放疗、化疗等方法试图将肿瘤细胞清除出体外或体内杀死肿瘤细胞，但是实践的效果却并不理想，往往会出现肿瘤的复发。因此，人们逐渐将注意力转向了如何提高肿瘤患者自身的免疫功能从而提高其清除肿瘤细胞的能力方面。肿瘤的免疫治疗作为传统治疗方法之外的第四大肿瘤治疗方法应运而生。目前的研究认为，肿瘤患者出现免疫缺陷主要原因是肿瘤细胞抑制了免疫细胞的活性或逃避了机体的免疫监督，但是除此之外是否存在其他抑制肿瘤患者免疫细胞功能的因素尚待探讨。众所周知，免疫系统受神经系统的调控。神经-免疫-内分泌系统在人体内构成网络，相互之间存在着影响。神经系统主要通过两条途径调节免疫系统:一是自主神经系统，分布于免疫器官，通过神经末梢释放神经递质控制免疫器官活动。另一条是通过下丘脑-垂体-靶腺途径调节免疫系统。已有大量研究表明，长期处于负向情绪（紧张、焦虑、压抑等）下的人群易患肿瘤，这类人群外周血中单胺类神经递质（5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素）水平会显著升高，可以达到正常状态(10-8-10-7M)的100倍以上。肿瘤确诊后，负向刺激进一步增强。长期处于这种负向应激状态下异常升高的单胺类神经递质会对免疫治疗产生何种影响是本研究关注的重点。 研究目的:通过研究不同浓度的单胺类神经递质对肿瘤细胞以及免疫细胞的影响，探索心理因素对免疫治疗产生的影响，为肿瘤免疫治疗联合心理治疗的临床应用提供理论基础。 研究方法:1）使用10-8M，10-7M，10-6M，10-5M四种不同浓度单胺类神经递质刺激SW480直肠癌细胞系72h，CCK-8法检测肿瘤细胞增殖的情况。2）取健康人外周血，密度梯度离心法分离PBMC，贴壁3h后取悬浮细胞，依次加入IFN-r，CD3 McAb、CD28McAb、IL-2，在第5天将培养基更换为Cellix602无血清培养基，培养至第14天收获CIK细胞。3）使用10-8M，10-7M，10-6M，10-5M四种不同浓度单胺类神经递质刺激收获的CIK细胞72h，CCK-8法检测CIK细胞增殖情况。4）抽取健康人外周血，密度梯度离心分离制备PBMCs，贴壁法细胞培养DC，使用SW-480细胞裂解物碎片致敏DC，将肿瘤抗原荷载的DC与未贴壁的PBMCs混合，加入到培养基中，14d后收获细胞毒性T淋巴细胞(CTL细胞)。5）ELISA法检测CTL上清液中IL-4和TNF-α的含量。6）流式细胞学检测CTL细胞表型。7）LDH释放法检测分别用不同浓度单胺类神经递质刺激的细胞毒性T淋巴细胞（CTL细胞）体外杀伤肿瘤细胞的作用。 研究结果:1）单胺类神经递质在10-5M浓度刺激肿瘤细胞，肿瘤细胞的活力出现明显增强。2）随着单胺类神经递质浓度升高，CIK细胞的活力逐渐减弱。高浓度的单胺类神经递质对CIK细胞活力具有明显抑制作用。3）高浓度(10-5M)下，三种单胺类神经递质联合作用抑制CTL细胞分泌TNF-α能力。4）高浓度(10-5M)的三种单胺类神经递质联合作用使Treg表型升高。5)5-羟色胺在10-5M浓度下刺激CTL细胞72h靶细胞杀伤率为31.72±3.19％，与在10-8M浓度时靶细胞杀伤率57.43±6.25％对比，差异均具有统计学意义。6）多巴胺在10-5M浓度下刺激CTL细胞72h靶细胞杀伤率为35.25±5.06％，与10-8M浓度时靶细胞杀伤率44.44±4.78％对比，差异具有统计学意义。7）去甲肾上腺素在10-5M浓度下刺激CTL细胞72h靶细胞杀伤率为30.73±4.33％，与10-8M浓度时靶细胞杀伤率59.31±4.53％对比，统计学差异明显。8）三种单胺类神经递质联合在10-5M浓度下刺激CTL细胞72h靶细胞杀伤率为23.29±6.26％，与10-8M浓度时靶细胞杀伤率55.74±5.88％相比，统计学差异明显。 研究结论:1）单胺类神经递质在高浓度(10-5M)条件下提高肿瘤细胞增殖率，降低CIK细胞增殖率。2）三种单胺类神经递质在高浓度(10-5M)条件下联合作用会抑制CTL细胞分泌TNF-α的能力。3）三种单胺类神经递质在高浓度（10-5M）条件下联合作用会升高CTL细胞Treg表型。4）单胺类神经递质在高浓度(10-5M)条件下降低CTL细胞体外杀伤肿瘤细胞的能力。