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背景：先天性房室间隔缺损（Atrioventricular septal defect, AVSD）是先天性心脏病的一种，又称为心内膜垫缺损，是由于存在房室间隔（房间隔下部、室间隔上部）以及中央心内膜垫组织的缺损而造成左右心腔之间的异常交通。根据其缺损的类型可分为部分性、过渡性及完全性三种类型，其中以完全性AVSD 的病情最严重。AVSD 病人往往早期即出现明显的心力衰竭和肺动脉高压；而且由于房室瓣膜（二尖瓣、三尖瓣或房室共同瓣）失去心内膜垫组织的支撑，外科手术治疗效果很差；其他类型AVSD 也依缺损的类型、大小及合并其他畸形等情况而严重程度不同。AVSD 患者既存在于散发人群中，也有家族性病例报道；很多病例还合并有一些综合征，最常见的是唐氏综合征（Down Syndrome），大约2/3 的唐氏综合症患者合并有先天性心脏病，其中将近一半是AVSD，表现出明显的密集发病现象，其原因目前不明；而先心病同时也是唐氏综合征患者最主要的死亡原因之一。AVSD 的发生机制尚未明了。心脏的房间隔下部、室间隔上部以及二尖瓣、三尖瓣等组织均由胚胎早期的房室心内膜垫（AV EndocardialCushion）发育而成，任何可以影响心内膜垫发育环节的因素，都有可能导致AVSD 的形成。先前的研究表明血管内皮生长因子(vascularendothelial growh factor，VEGF) 信号通路在胚胎心内膜垫的形成过程中发挥重要作用。因此我们推测位于染色体6p12 上VEGF 基因很有可能是AVSD 的侯选基因。然而到目前为止，国内外仍然没有明确VEGF 基因是否与AVSD 的发生有关联。因此本研究通过对123例不同类型的AVSD 患者VEGF 的8 个编码外显子及其侧翼测序进行研究分析，以调查AVSD 患儿中VEGF 基因的突变情况，旨在揭示VEGF 基因在先天性房室间隔缺损发生中的作用，并试图找出带有VEGF 基因突变患者的基因型与表型的关系，为预防AVSD 的发生及制订防治对策提供一定的科学依据。
目的：①调查AVSD患儿中VEGF基因的突变情况。②分析VEGF基因突变患者的基因型与表型的关系。
方法：⑴收集2007 年1 月-2010 年12 月在上海市儿童医院及上海儿童医学中心住院治疗的先天性房室间隔缺损患儿123 例。所入选的AVSD病人均经过超声心动图，心导管造影术或者外科手术证实。7 例合并有21-三体综合症患儿均经过常规染色体检查确诊。健康对照组为同期在上海市儿童医院儿童保健科体检的正常儿童100 例，均由家长签署知情同意书。⑵在取得每个病人和对照者家长的同意并签署同意书后，采集2mL外周血于肝素钠抗凝管中。基因组DNA 的抽提全部采用DNA 试剂盒抽提并纯化，-20℃保存，扩增所有VEGF 基因8 个编码外显子及两侧各50 个碱基序列，通过DNA 序列测定了解有无基因突变，并分析基因变异是否导致氨基酸改变。⑶结果分析及统计学处理：采用SPSS 13.0 统计软件进行统计学处理。以Hardy-Weinberg 平衡检验确认研究样本的群体代表性。计数资料的比较采用Fisher 精确概率法。P<0.05 为差异有统计学意义。
结果：①在123例患者中共发现19例位于外显子1上的2种同义突变(17case c.C1025T aa S342S; 2 cases G225A aa E75E)，其中一种17例病例在NCBI的SNP数据库中被提交为编码SNP(rs25648)，4例(1 cases c. A825CaaV275V ; 1 case T708C aa E236E; 2 cases A747G aa I249I)位于外显子3上的3中同义突变，并且在100例对照组中未检测到相同的突变。②1例患儿发现外显子1上的插入突变（插入序列为22_23InsGACA）该患儿为男性，年龄为5个月，完全性房室间隔缺损合并21-三体综合症。通过对100例健康对照组样本比较未发现相同位点的序列插入突变。这一突变导致开放阅读框架在DNA编码区第253-255位产生TAG终止密码子，使得氨基酸产物从第8位即发生变化，肽链延长至85位氨基酸既出现TAG终止密码子。这使得VEGF的肽链长度由正常的412个氨基酸减少为84个氨基酸。③外显子5上发现1例962位错义突变（碱基变化A>G，氨基酸变化为K321R）。该患儿为女性，年龄为7岁，部分性房室间隔缺损。通过对100例健康对照组样本比较未发现相同位点的错义突变。④外显子1的编码前区15bp检测到碱基错义突变A>C，此位置尚不处于VEGF的启动子区域。5.AVSD患者中VEGF基因的突变率为1.6％ (2/123)。
结论：⑴VEGF 基因与人类的心内膜垫和房室瓣的发育有关，VEGF 基因突变与先天性房室间隔缺损的发病具有相关性。⑵VEGF 在AVSD 患儿中基因突变的检出率并不高，提示AVSD 可能是多基因遗传，或者潜在的环境因素抑或是环境和基因的共同作用参与了AVSD 的形。⑶推测这些与AVSD 具有一定的相关性基因的作用机制可能于VEGF 有关联，抑或是共同作用而影响心内膜垫的缺损而导致AVSD的形成。本课题为深入探讨VEGF 在AVSD 发生中的作用奠定了坚实的基础，对进一步阐述的AVSD 发生机制具有重大的理论价值。