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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种繁殖障碍与呼吸系统传染病。猪是此病的唯一天然宿主。该病以接触性、高度传染性、高发病率,慢性和高死亡率为特征。病猪生长十分缓慢,甚至停滞生长,严重影响养猪业的经济效益,因此对该病及时作出诊断有利于降低经济损失。本研究针对目前PRRS诊断耗时长的问题,运用胶体金免疫层析技术建立PRRS抗体快速诊断方法。本研究以PRRSV POP3毒株为试验材料,结合使用中性盐沉淀法和凝胶层析法获得其结构蛋白,经SDS-PAGE电泳检测显示含六条蛋白条带,分子量分别为：68.1KD、55.2KD、38.9KD、37.6KD、35.1KD、33.9KD,其中55.2KD.38.9KD.37.6KD、35.1KD、33.9KD为PRRSV蛋白。用纯化的PRRSV POP3株病毒蛋白制备铝胶疫苗免疫2kg左右成年健康家兔,获得的兔抗PRRSV高免血清与纯化的PRRSV POP3株病毒蛋白经双向琼扩试验,检测到抗血清效价为1：16。采用辛酸-硫酸铵盐析分离纯化血清IgG,经SDS-PAGE检测显示分子量为56.5KD和26.6KD的蛋白条带。以柠檬酸三钠为还原剂制备胶体金,用紫外分光光度计(400nm-700nm)扫描分析显示,制备的胶体金颗粒大小均一,约为19.76nm,适合免疫标记。以制备好的胶体金标记纯化的PRRSV POP3株病毒蛋白,获得稳定的免疫胶体金。确定最佳标记条件为：pH=7.8,病毒蛋白的标记结合量为4.8μg/ml。用标记好的免疫胶体金浸泡聚酯纤维素膜,干燥后制得金标垫。同时将纯化的PRRSV POP3株病毒蛋白和兔抗PRRSV IgG分别作为诊断试纸的检测线(T线)和控制线(C线)包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上,组装成试纸条。确定了免疫胶体金的稀释度为1：1,T线包被浓度为1 mg/ml,C线包被浓度为2mg/ml。用研制的PRRS抗体试纸条与ELISA检测方法分别对36份血清样品进行检测。结果显示ELISA法检测阳性率为75%,PRRS抗体诊断试纸检测阳性率为61.1%。用PRRS抗体试纸条检测与ELISA检测方法进行比较,结果显示PRRS抗体试纸条的敏感度为81.5%,特异度为100%,符合率为86.1%,重复性良好。试验证明PRRS抗体试纸条具有高效、价廉、敏感性高、特异性强、操作简便便于基层推广的实际运用价值。