论文部分内容阅读
目的:本研究在维吾尔医学(维医)体液论的指导下成功建立异常胆液质载体溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)病证大鼠模型,检测异常胆液质载体UC病证模型组和正常组大鼠结肠组织中IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS等四种炎症相关因子的hnRNA和mRNA表达水平的变化及NF-κB对上述四种炎症相关因子基因转录活性的调控机制,从而阐述NF-κB在异常胆液质载体UC病证发生、发展中的作用机制。方法:根据维医体液论建立异常胆液质载体证候模型的基础上,采用TNBS/乙醇法构建异常胆液质载体UC病证大鼠模型,将动物分为正常组和异常胆液质载体UC病证模型组,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测两组大鼠结肠组织中IL-1α、IL-1β、iNOS、e NOS的hnRNA与mRNA表达水平,并分析其表达差异,应用染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)-qPCR方法,检测NF-κB与候选基因IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS调控序列的亲和力,阐述存在表达差异的分子机制。结果:1)异常胆液质载体UC病证模型组大鼠体征、症状、结肠粘膜损伤等均符合异常胆液质载体UC病证模型的判定标准;2)qRT-PCR结果显示,与正常组比较,异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠组织中IL-1α、IL-1β、iNOS的hnRNA表达水平均上调,差异有统计学意义(P<0.05),而eNOS的hnRNA表达水平无统计学意义(P>0.05);与正常组比较,异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠组织中IL-1α、IL-1β、iNOS、eNOS的mRNA表达水平均上调,差异有统计学意义(P<0.05);3)ChIP-qPCR结果显示,与正常组比较,异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠组织中NF-κB增强IL-1α、IL-1β、iNOS基因的转录活性,而对eNOS基因转录活性的调控作用不明显。结论:1)异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠组织中出现免疫功能紊乱;2)异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠组织中NF-κB通过与IL-1α、IL-1β、iNOS等候选基因调控序列的结合,增强候选基因的转录活性,从而促进候选基因的表达;3)异常胆液质载体UC病证大鼠结肠组织中炎症相关因子表达水平的调控除了NF-κB的转录水平调控作用外,还可能存在RNA的稳定性相关的转录后调控机制。