核酸扩增技术广泛地应用于痕量核酸的检测中。本论文主要是对本实验室构建的一种单引物引发的核酸等温扩增方法(Single Primer-triggered Isothermal Amplification for Double-stranded DNA detection, SAMP)进行条件优化,并利用此方法对实际样品乙型肝炎病毒(HBV)进行了检测研究。本论文采用正交试验法对聚合酶、切刻酶、引物用量以及反应温度进行优化,得到了最优的水平组合,聚合酶用量为0.05μL,切刻酶用量为0.4μL,引物浓度为5.0×10-7 M以及温度为55℃。然后,利用本方法在最优的条件下对质粒靶标进行了检测,结果显示该方法可检测到1.0×10-17 M,因此,该方法具有较好的检测限。本论文还采用了纳米金比色的方法对扩增结果进行了分析。SAMP体系反应35 min后,加入纳米金进行比色。结果显示,高浓度的靶标体系有着明显的颜色变化,而低浓度的靶标体系以及空白对照都没有发生颜色变化。因此,利用这种方式,我们可以实现目标的灵敏比色检测。最后,利用此方法在最优反应条件下对HBV实际样品进行检测,本方法针对中国常见的HBV-B型、HBV-C型以及HBV-D型这三种类型进行了引物设计并检测,其中HBV-D型的检测限可达到1.0×10-17M,可以和荧光定量PCR相媲美。另外,对于HBV-B型、HBV-C型的检测还需要进一步对引物进行优化,以期取得更好的灵敏度。