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本研究采用聚乙二醇（PEG）修饰技术对重组灵芝免疫调节蛋白（recombinantGanoderma lucidum immunomodulatory protein，rLZ-8）进行化学修饰，通过改变其化学结构以制备出rLZ-8的长效制剂。PEG修饰是一种能有效解决蛋白质类药物药用过程中半衰期短、易产生免疫原性、易被酶解等缺陷的最有效手段。因为聚乙二醇链的空间阻碍作用使得被修饰蛋白对蛋白酶酶解的抵抗能力大为提高，同时被修饰分子的分子排阻体积明显增大，使得其肾脏过滤清除率显著降低。此外，聚乙二醇分子的结构特异性使得肝脏网状内皮系统对被修饰药物的识别摄取和清除能力有所降低，并且可以降低或者消除诱导产生中和抗体和与抗体结合的能力，使其不易被免疫系统识别和清除，从而延长药物的有效血药浓度维持时间，减少用药剂量和用药次数。本研究采用单甲氧基聚乙二醇丙酸琥珀酰亚胺酯（mPEG-SPA）作为修饰剂，对rLZ-8的赖氨酸以及N端氨基进行化学修饰，并对修饰反应系统的pH值、mPEG-SPA与rLZ-8的摩尔比、离子强度、反应温度及反应时间进行优化，筛选出最佳的只有单一修饰产物的修饰条件，以获得单一组分的修饰产物；修饰产物的纯化采用分子筛原理色谱柱，纯化后即可获得高纯度的修饰产物；修饰产物生物活性的研究采用HL60细胞凝集实验测定修饰前后蛋白活性，选择BrdU法检测修饰前后蛋白的促T淋巴细胞增殖活性；修饰产物的特性研究采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱议鉴定修饰产物的分子量，并对mPEG-SPA的修饰位点进行了确证。本研究为rLZ-8及其修饰产物的药效学及药动学研究提供科学依据。本实验创新性地将蛋白质结构的理论分析与PEG修饰技术相结合，推测出mPEG-SPA的氨基修饰位点及多种修饰产物等电点的变化，大大简化了形成修饰产物纯化工艺的过程，解决了本项目中最为关键的技术难题，为蛋白类药物的PEG修饰提供全新的研究方案和重要的技术资料。该项技术成果将填补国际同类研究领域的空白。