植物来源的山奈酚在体外具有较高的抗氧化活性,而且对大多数疾病都有很好的治疗效果,但是山奈酚的溶解度低,渗透性差,生物利用度低,临床效果并不理想。使用生物聚合材料包埋小分子化合物是解决水溶性差问题的主要策略之一。小麦醇溶蛋白作为天然蛋白,具有独特的自组装特性、胃肠道的粘附性以及很好的生物相容性。因此我们通过反溶剂法设计出了负载山奈酚的小麦醇溶蛋白纳米粒子,并对其进行了一系列的结构表征和抗氧化活性方面的研究。首先,我们通过反溶剂法制备小麦醇溶蛋白包埋山奈酚纳米粒子,借助仪器综合考察纳米粒子的粒径、Zeta电位、包埋率和载药率,研究了搅拌速度、反溶剂p H、滴加速度以及山奈酚/小麦醇溶蛋白投药比对纳米粒子的影响。我们发现山奈酚/小麦醇溶蛋白投药比为1:10时,粒子的载药率与粒径达到最佳平衡状态。最终制备出纳米粒子的平均粒径为182.3±3.6 nm,PDI为0.141±0.02,Zeta电位为20.2±0.73 m V,载药率为5.4%,包埋率为16.2%。然后通过红外、紫外、荧光、扫描电子显微镜手段进行分析表征,结果表明负载山奈酚的小麦醇溶蛋白纳米粒子呈圆球状,表面光滑,大小均一,主要通过氢键、疏水作用和静电相互作用相结合。同时山奈酚改变了蛋白质的二级结构,使小麦醇溶蛋白的无规则卷曲结构转变为α-螺旋和β-折叠。负载山奈酚的小麦醇溶蛋白纳米粒子具有良好的稳定性和水分散性,同时具备良好的生物相容性和生物安全性。与游离山奈酚相比,其具有更强的清除DPPH自由基能力和Fe3+还原能力,可以更有效地清除H2O2诱导产生的活性氧。最后,研究表明小麦醇溶蛋白包埋山奈酚纳米粒子的抗氧化作用机制与游离山奈酚相同,说明其抗氧化活性主要来源于颗粒组分中的山奈酚,都是通过介导Nrf2/HO-1信号通路,上调谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的水平,减轻了H2O2诱导的氧化应激损伤。