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目的:探讨肿瘤间质活化的成纤维细胞分泌的成纤维激活蛋白(Fibroblast Activation ProteiN,FAP)在卵巢癌细胞侵袭和转移中的作用。转化生长因子-β1(TGF-131)、白介素-1p(IL-Iβ)和条件培养基(CM)是否可以诱导成纤维激活蛋白(FAP)表达。
方法:传代培养卵巢癌细胞系(HO-8910PM)和成纤维细胞(NIH3T3),将转化生长因子-βl(TGF-βl)、白介素-1β(IL-1β)和条件培养基(CM)加入成纤维细胞(NIH3T3)培养液中,应用免疫荧光和Western blot技术检验转化生长因子-β1(TGF-βI)、白介素-1β(IL-lβ)和条件培养基(CM)是否可以诱导成纤维细胞(NIH3T3)表达FAP蛋白,并且可以诱导成纤维细胞(NIH3T3)向肌成纤维细胞转化并表达功能性标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。在体外实验应用Transwell小室法验证FAP蛋白是否可以促进卵巢癌细胞系(HO-8910PM)发生转移和侵袭。
结果:浓度为2ng/ml TGF-β1联合IL-Iβ和条件培养基(CM)明显使NIH3T3向肌成纤维细胞转化,并且表达FAP蛋白和α-SMA蛋白。浓度为100PM的FAPα蛋白明显促进HO-8910PM细胞发生转移和侵袭(P<0.0001)。
结论:TGF-β1和条件培养基(CM)可以明显促进FAP蛋白的表达,并且使NIH3T3细胞向肌成纤维细胞转化并且表达标志性蛋白α-SMA。TGF-β和IL-1β存在协同效应诱导NIH3T3细胞向肌成纤维细胞转化并且表达α-SMA。肿瘤间质活化的成纤维细胞分泌FAP蛋白,FAP蛋白可以促进卵巢癌细胞发生转移和侵袭。