腺病毒介导GPX基因转染对香烟烟雾提取物致血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响

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目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响,腺病毒介导GPX基因转染血管内皮细胞后,能否抑制香烟提取物致血管内皮细胞的氧化应激和凋亡。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株(ECV304),取指数生长期细胞用于实验。将ECV304分四组:分别予0%CSE(空白组)、10%CSE(CSE组)、LacZ+10%CSE(LacZ组)、GPX转染+10%CSE(GPX转染组)。收集各组干预24h后细胞爬片,TUNEL法检测细胞凋亡率(AI),H2DCFDA染色法,经激光共聚焦显微镜检测细胞内ROS。结果1.70MOI的腺病毒介导的LacZ转染率高达(93.3±2.9)%。2.10%CSE干预ECV304 24h后,其AI高于0%及5%CSE干预组,差异有统计学意义(p均<0.05)。10%CSE干预ECV304 24h后,其AI高于0h、6h和12h组,差异有统计学意义(p均<0.05)。3.10%CSE干预ECV304 24h后,与空白组比较,其细胞内ROS增加,差异有统计学意义(p均<0.05)。4.腺病毒介导的GPX基因转染后的ECV304,经10%CSE干预24h后,与CSE组及LacZ组比较,其细胞内ROS降低,AI降低,差异有统计学意义(p均<0.05)。5.四组ECV304细胞内ROS水平与AI呈正相关(n=5,r=0.775,p<0.01)。结论1.CSE能导致内皮细胞氧化应激和凋亡,其致凋亡作用呈时间和浓度依赖性。2.腺病毒介导GPX基因转染可以部分抑制CSE致内皮细胞氧化应激和凋亡。3.CSE致内皮细胞凋亡可能与氧化应激有相关。
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