【摘 要】
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目的:观察糖尿病小鼠牙齿牙合向伸长过程中根尖周组织内RAGE和BSP因子的表达,探究糖尿病在牙齿牙合向伸长运动过程中对根尖周组织的影响。方法:将120只体重在20g-25g的雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组,分为糖尿病组（n=40）、阴性对照组（n=40）和空白对照组（n=40）。适应性喂养两周,糖尿病组高脂饮食饲养。两周后三组均禁食10h,糖尿病组通过腹腔注射80mg/kg剂量的链脲佐菌素
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目的:观察糖尿病小鼠牙齿牙合向伸长过程中根尖周组织内RAGE和BSP因子的表达,探究糖尿病在牙齿牙合向伸长运动过程中对根尖周组织的影响。方法:将120只体重在20g-25g的雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组,分为糖尿病组（n=40）、阴性对照组（n=40）和空白对照组（n=40）。适应性喂养两周,糖尿病组高脂饮食饲养。两周后三组均禁食10h,糖尿病组通过腹腔注射80mg/kg剂量的链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病模型,阴性对照组腹腔注射等量的柠檬酸钠溶液,空白对照组则不做处理。糖尿病模型建立成功后,糖尿病组随机选出30只小鼠组成糖尿病组小鼠,其余两组也随机选出30只小鼠作为阴性对照组和空白对照组,分别拔除糖尿病组、阴性对照组及空白对照组小鼠右侧上颌磨牙,再将三组小鼠随机分为0d、3d、6d、9d、12d的5个亚组（n=6）,按组别定时处死,提取右侧下颌骨。每组中随机选取3只小鼠的右侧下颌骨通过实时荧光定量PCR观察RAGE和BSP因子基因表达的水平;对各组中剩余3只小鼠的右侧下颌骨磨牙根尖周组织进行免疫组化染色观察RAGE和BSP蛋白表达水平的变化。结果:1.实时荧光定量PCR结果:糖尿病组BSP mRNA的相对表达量明显少于空白及阴性对照组（P<0.05）,空白对照组BSP mRNA相对表达量与阴性对照组相比无明显差异（P>0.05）;随拔牙时间延长,三组BSP mRNA相对表达量呈持续增长的趋势,糖尿病组在3d到6d之间表达量增加最快,6d到12d时增长趋势放缓,空白及阴性对照组在6d到9d时增长速度较快;糖尿病组BSP mRNA相对表达量的增长趋势整体较空白及阴性对照组平缓。糖尿病组RAGE mRNA相对表达量明显高于空白对照组和阴性对照组（P<0.05）;空白及阴性对照组RAGE mRNA相对表达量无明显变化（P>0.05）;随拔牙时间延长,三组RAGE mRNA的相对表达量均为持续增加的趋势,糖尿病组在3d到6d之间表达量增加最快,9d到12d时增长速度放缓,空白及阴性对照组在6d到9d时增长速度较快;糖尿病组RAGE mRNA相对表达量的增长趋势整体较空白及阴性对照组明显。2.免疫组化染色结果:糖尿病组与空白、阴性对照组BSP阳性率结果显示:三组小鼠磨牙根尖周BSP的阳性率随拔牙时间延长均越来越高。在拔牙后的6d、9d、12d糖尿病组BSP阳性率显著低于空白及阴性对照组（P<0.05）;空白与阴性对照组相比较无明显差异（P>0.05）。糖尿病组与空白、阴性对照组RAGE阳性率结果显示:三组小鼠磨牙根尖周RAGE的阳性率随拔牙时间延长均越来越高。在拔牙后0d、3d、6d、9d、12d糖尿病组RAGE阳性率显著高于空白及阴性对照组（P<0.05）;空白对照组与阴性对照组相比无明显差异（P>0.05）。结论:1.糖尿病组小鼠拔除右上颌磨牙后,右下颌磨牙根尖周BSP免疫组化染色和PCR结果显示,随着拔牙时间延长表达量逐渐增加,但增长速度低于阴性及空白对照组,在0d、3d、6d、9d、12d其表达量均较低,提示糖尿病可能抑制BSP的表达。2.糖尿病组小鼠根尖周组织中RAGE表达水平和基因表达水平均显著高于阴性及空白对照组,随着拔牙时间延长表达量逐渐增强,提示高RAGE水平可能与糖尿病导致加速根尖周组织破坏,延缓组织重建速度有关。
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