HIV-1衣壳前体蛋白性质分析及表位初步研究

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艾滋病是以人体免疫系统严重损害为特征的传染性疾病,一旦感染,终生携带。其病原体为人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV),迄今对此病没有有效治疗手段,经历HIV潜伏期后,感染者终将死于感染或肿瘤。因此,对艾滋的预防、诊断以及对艾滋患者病情监控尤为重要。在HIV感染后,人体内的针对Gag蛋白的抗体水平都可以作为病情监控的指标,编码它们的Gag基因高度保守,因此对Gag生物学性质分析以及表位研究对于艾滋病的诊断和治疗具有重要现实意义。   本研究通过原核表达获得HIV-1两种亚型Gag的p41蛋白(基质蛋白p17和衣壳蛋白p24部分),即C亚型M41和B亚型N41,其中C亚型p41为二聚体,同时本实验已有216株广谱或特异的p24单抗;通过对HIV-1阳性血清的检测发现p41能够对HIV-1阳性血清检测效果更好;在和p24广谱单抗相互作用时,p41的反应性强于p24,而这种增强作用与p24抗体表位位于p24的NTD或CTD无关,推断p17对p24的结构起到了一定的作用,对p24表位产生了影响;通过与p24特异单抗(P9A1)亲和力测定发现,p4l和抗体P9A1的亲和力提升了近100倍。在对p41和p24采用不同方式免疫后进行比较,发现p41免疫原性显著优于p24。   利用HBV core展示p17和p24之间的连接区域以及逐步截短p17的方法,发现连接区域的表位在检测中贡献不明显,同时041在检测中的作用随着p17蛋白的变短而降低;通过对现有的64株p24广谱单抗交叉阻断发现这些抗体对p24和p41两种蛋白表现一致,推测p17对p24的主要作用是对p24的表位产生了一定的影响。
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