论文部分内容阅读
目的：本研究旨在了解锂-匹鲁卡品诱导的癫痫发作大鼠模型和颞叶癫痫患者中dynamin1表达水平,并将dynamin1特异性抑制剂运用于体内和体外实验以探究dynamin1与癫痫发作的关系。方法:课题组前期收集癫痫患者及对照组人脑组织,在癫痫患者和对照组人脑组织中,用逆转录PCR检测dynamin1基因的mRNA水平,并用western blot和免疫荧光法,测定dynamin1在人脑组织的蛋白表达水平和表达部位。对于匹鲁卡品诱导建立的大鼠癫痫模型,用上述相同实验测定动物脑组织中dynamin1表达情况。侧脑室注射dynamin1特异抑制剂dynasore后再造模观察大鼠模型行为学变化,并采用膜片钳技术观察dynasore对痫样放电兴奋性的影响。结果：研究发现匹鲁卡品诱导的大鼠癫痫模型中不同时间点(1天,3天,7天)和对照组相比, dynamin1的mRNA水平和蛋白水平较对照组均增高，且癫痫患者与对照组比较，dynamin1的mRNA水平和蛋白水平明显高于对照组。Dynamin1主要在神经元的胞浆和轴突表达,星形胶质细胞未见表达。研究发现dynasore为10μM组大鼠癫痫发作潜伏期明显延长,发作程度减轻，发作频率降低。全细胞膜片钳记录到用无镁外液诱导出持续痫样放电后，浓度为10μM的dynasore能明显减少动作电位频率。但在行为学和膜片钳实验中，一致发现dynasore浓度为1μM和160μM时与DMSO组和生理盐水组未见明显差异。结论：我们的研究发现在癫痫动物模型和癫痫患者中，dynamin1的mRNA水平和蛋白水平均升高，其特异性抑制剂dynasore在特定浓度（10μM）下具有在体内匹罗卡品/体外癫痫脑片模型抗癫痫发作作用，说明dynamin1可能和癫痫发作相关，其特异性抑制剂dynasore具有抗癫痫发作的效应，但其具体抗癫痫发作机制有待进一步研究。