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醛类和酮类化合物是食品香味的主要组分,广泛存在于环境中。许多药物和生物活性物质分子也含有醛基和羰基。由于有些羰基化合物对人的健康产生不利影响,如致癌、致畸变等,因此引起许多环境学家、生物学家、毒理学家的兴趣。由于羰基化合物极性较大,所以应用常规GC分析是很困难。另外,由于这些化合物在ESI下不易质子化或去质子化,所以很难直接使用质谱仪检测。衍生化法是解决上述问题的主要解决方法。至今,人们开发了许多醛类和酮类化合物衍生化试剂,但各有优缺点。本文开发了一种衍生化试剂Hy-PPZ,该衍生化试剂有如下特点:Hy-PPZ含有肼基,可以与醛酮化合物进行希夫碱反应生成衍生物;Hy-PPZ分子结构中有二硝基苯,其具有很强的紫外吸收;Hy-PPZ有甲基哌嗪基,它易于质子化或用CH3I进行甲基化反应,使其带有正电荷,可提高质谱检测灵敏度。用Hy-PPZ作为醛酮化合物的衍生化试剂,建立了10种醛酮化合物(脂肪醛,芳香醛酮,环状酮)的分析方法,并用于实际样品的分析。 本研究主要内容包括:⑴衍生化条件以0.1MHCl为酸性催化剂,恒温40℃条件下反应30min,反应过程简单,产物稳定,反应效率高。本实验应用两种色谱柱分离,色谱柱1:MIGHTYSIL RP-18GP(150×4.6 mm,3μm),流动相:乙腈:水=68:32(V/V);色谱柱2:华谱Unitary C18(150×4.6 mm,2.8μm),流动相:VCH3CN/VCH3OH=55:45;有机相(VCH3CN/VCH3OH=6:4):水=55:45(0.1%甲酸,V/V);紫外检测波长:354 nm;柱温:25℃;流速:0.5 mL/min;进样量:10μL。⑵10种醛酮在最佳衍生化条件、色谱条件下得到较好的分离,且线性关系、精密度、稳定性均得到方法验证,结果表明10种醛酮化合物在10nM到600nM检测范围内,呈良好线性关系(R2=0.9885-0.9996),RSD<4.4%,最低检测限0.6pmol-600pmol。⑶在LC-ESI-MS正离子模式下检测,醛酮化合物的衍生化产物均有较高的响应,醛酮化合物为60ng时质谱峰强度可达104,可见Hy-PPZ作为醛酮化合物衍生化试剂具有高效、高灵敏反应的优点。利用本法对实际样品小茴香中对甲氧基苯甲醛进行了测定,均取得了较为满意的结果。