FMRF酰胺对小鼠嗅感觉神经细胞外向延迟整流钾电流的影响

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目的:探讨FMRF酰胺(苯丙—甲硫—精—苯丙氨酸多肽)对小鼠嗅感觉神经细胞外向延迟整流钾电流的作用,以明确其在嗅觉的产生和传导中的作用。方法:应用酶结合机械分离的方法,急性分离小鼠嗅感觉神经细胞,并将状态良好的神经细胞用于全细胞膜片钳技术。膜片钳记录时,将TTX及CdCl2加到细胞外液中,阻断内向钠电流和钙电流,因此,我们实验中我们只记录了小鼠嗅感觉神经细胞的外向钾电流。FMRF酰胺以5μm的终浓度加到细胞外液中,设定相应程序,记录加药前后外向延迟整流钾电流的变化。所得的数据经过膜片钳放大器放大滤波后,输入计算机,用pCLAMP8.1软件系统进行数据采集和分析。研究在细胞外液中加入5μm的FMRF酰胺对小鼠嗅感觉神经细胞胞体的外向延迟整流钾电流(IK)的峰值电流幅度和最大电流密度以及电压依赖性激活动力学特性的影响。实验数据均以“均数士标准差”(x±s)的形式表示。应用SPSS11.0软件包中配对t检验进行统计分析,P<0.05认为具有统计学差异。结果:急性分离的小鼠嗅感觉神经细胞,其细胞膜上可以记录到内向钠电流和外向钾电流,其中外向钾电流主要由延迟整流钾电流IK和瞬时钾电流IA组成。IK具有延迟激活和不失活的特性,而IA快速激活后快速失活。在细胞外液中加入5μm的FMRF酰胺可以加大IK电流的峰值电流幅度和最大电流密度,但是,并不影响该电流的电压依赖性激活动力学。结论:(1)利用酶结合机械分离方法可以成功分离状态良好的小鼠嗅感觉神经细胞,并应用于全细胞膜片钳技术的研究。(2)胞外的FMRF酰胺可以增大IK电流的峰值电流幅度和最大电流密度。(3)FMRF酰胺并没有改变IK电流的电压依赖性激活动力学特性。(4)FMRF酰胺通过改变IK电流的最大电流峰值和最大电流密度,延长小鼠嗅感觉神经细胞去极化和复极化过程,抑制细胞的兴奋性,从而调节外周嗅觉信号的传递。
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