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目的1.研究中国人家族性胃癌遗传特点并对其临床病理特征进行分析。2.研究候选易感基因TOX3对胃癌细胞生物学行为的影响并分析TOX3与胃癌病理分级的相关性;为中国人家族性胃癌患者及家系成员早期筛查、遗传风险评估及临床指导提供依据。方法1.收集全国20个符合家族性胃癌诊断标准的家系病理资料并绘制家系图;回顾性分析厦门大学附属中山医院2011年1月至2016年7月收治的620例散发性胃癌患者的临床病理资料,包括性别、年龄、肿瘤位置、病理类型、家族成员肿瘤史等。分析并比较家族性胃癌与散发性胃癌的临床病理差异。2.在分子水平、细胞水平和组织水平研究TOX3在胃癌发生、发展中的作用。应用Western blot、Real-time PCR技术检测TOX3在胃癌细胞及胃粘膜永生化细胞中的表达情况;通过构建TOX3稳定敲减的细胞株MGC803-shTOX3,应用克隆形成实验、Transwell细胞迁移实验及划痕实验研究TOX3对胃癌细胞增殖和迁移的影响;应用免疫组化技术检测TOX3在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,并分析蛋白表达与组织病理分级的相关性。结果1.20个家族性胃癌家系中,共227名成员,包括76名胃癌患者和151名患者直系/旁系亲属或配偶。分析发现,家族性胃癌中82%的肿瘤位于贲门,13.1%位于胃窦,而散发性胃癌中贲门癌和胃窦癌所占的比例分别为32.7%和56%,差异有统计学意义(P≤0.0001)。在组织学分类中,家族性胃癌75.4%是腺癌,23%是粘液细胞癌,1.6%是鳞癌;散发性胃癌腺癌占87.3%,粘液细胞癌占11.1%,鳞癌占1.6%,差异有统计学意义(P=0.026)。家族性胃癌低分化比例为83.6%,中分化比例为13.1%,高分化比例为3.3%,散发性胃癌低分化、中分化和高分化所占比例分别为66.6%,28.9%和4.5%,两者相比差异有统计学意义(P=0.023)。家族性胃癌与散发性胃癌患者在性别、发病年龄和肿瘤临床分期方面差异无统计学意义(P>O.05)。2.Western blot和Real-time PCR结果显示,TOX3在胃癌细胞中的表达量低于胃粘膜永生化细胞;克隆形成实验结果显示,敲减TOX3后,胃癌MGC803细胞的增殖能力增强。Transwell实验和划痕实验结果显示,与对照组相比,TOX3敲减后,胃癌MGC803细胞的迁移能力明显增强;利用免疫组化技术检测TOX3在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达量,结果显示,TOX3在胃癌组织中的表达量低于癌旁正常组织;并且TOX3的表达与胃癌的病理分级呈正相关。结论1.与散发性胃癌相比,家族性胃癌发病部位以胃部近端多见,尤其是贲门部;组织类型以腺癌为主,但粘液细胞癌有增多的趋势;家族性胃癌肿瘤恶性程度高。因此对家族性胃癌家系成员进行遗传风险评估和指导并通过定期查体筛查,可以发现早期胃癌改善预后。2.综上分子、细胞水平实验结果,可以推测TOX3在胃癌发生或/和发展中扮演了抑癌基因的作用。3.根据外显子测序结果分析推测TOX3可能为家族性胃癌的易感基因,本研究的分子、细胞生物学实验进一步证实TOX3作为家族性胃癌易感基因的潜在价值,其具体作用机制的明确还需要进一步探讨。