【摘 要】
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为了发展经济有效、安全的促进动物生长的新技术,本研究应用基因克隆、细胞培养、蛋白表达、酶免疫测定、放射免疫测定、冰冻切片等技术,以pcDNA3.1(-)和pEGFP-N1为质粒载体,
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为了发展经济有效、安全的促进动物生长的新技术,本研究应用基因克隆、细胞培养、蛋白表达、酶免疫测定、放射免疫测定、冰冻切片等技术,以pcDNA3.1(-)和pEGFP-N1为质粒载体,构建多种生长抑素基因与乙肝表面抗原S(HBsAg S)基因融合的真核表达质粒,并免疫大鼠,探讨影响生长抑素基因疫苗基因表达、免疫应答、免疫促生长效果及安全性的因素,为建立促进动物生长的基因免疫技术,加速生长抑素基因疫苗的临床应用奠定基础.1生长抑素与乙肝表面抗原融合基因表达质粒的构建及鉴定①融合基因表达产物抗原表位预测.②生长抑素与乙肝表面抗原融合表达质粒的构建及鉴定.2生长抑素DNA疫苗质粒pEGS/2SS在大鼠体内的表达分布.3生长抑素基因免疫的免疫应答及其影响因素.4生长抑素基因免疫对大鼠生长及生长相关激素的影响.综上所述,本研究通过对不同质粒不同剂量免疫大鼠的实验,发现质粒中生长抑素拷贝数和剂量均影响生长抑素DNA疫苗的免疫反应性,含2拷贝生长抑素的质粒免疫反应性明显优于含单拷贝生长抑素的质粒,免疫剂量的适当增加提高了免疫反应性;pcS/2SS质粒50 μ g组的免疫反应性最好,抗体阳性率达到60%;促生长效果较好的为pcS/2SS质粒1 0 μ g组,在生长的后期表现出一定的促生长效果;生长抑素DNA疫苗质粒pEGS/2SS在表达分布方面具有较好的安全性.
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