催乳素释放肽(PrRP)可以结合G蛋白偶联受体中的孤儿受体GPR10,因其可以促进催乳素释放,故命名为催乳素释放肽。自1998年发现之日起,对于PrRP的功能研究报道有超过150篇文献,PrRP除了能够特异性促进垂体前叶细胞分泌释放催乳素外,还在心血管系统、应激调节、食物摄入、睡眠觉醒、痛觉调节、神经内分泌等方面具有十分重要的作用。PrRP受体分布广泛,主要位于垂体、丘脑网状核、孤束核,垂体前叶等。为了从细胞水平上研究PrRP受体被激活后所引起的信号转导,方便后续PrRP多肽的构效关系研究,我们合成了人PrRP31肽和人PrRP20肽,成功建立了稳定表达PrRP受体的HEK293细胞模型,并对其信号转导机制进行了初步探索。首先我们用F-moc保护的固相合成方法合成了hPrRP31肽和hPrRP20肽,随后构建了带有Flag标签的PrRP受体的表达载体,测序鉴定无误后转染HEK293细胞,经过G418抗性筛选,通过细胞基因组水平、转录水平和蛋白表达水平的多重鉴定,得到了能够稳定表达PrRP受体的HEK293阳性细胞株。随后我们采用PrRP肽(hPrRP31和hPrRP20)作为激动剂处理细胞,发现可以激活MAPK途径中的ERKl／2磷酸化。PrRP作用不同浓度和不同时长后,对细胞内ERKl／2磷酸化水平具有不同的调节作用。用PKC抑制剂处理后ERK1／2的磷酸化水平明显降低,说明该过程是通过PKC通路激活的。