【摘 要】
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本实验以杂交春石斛(Dendrobium.Gold.Star“ORANGE ROYAL”×Dendrobium.Pink.Doll‘ELEGANCE’)为材料,在常温培养条件下,生长调节剂处理(454.5μmol/L浓度TDZ水溶液)诱导
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本实验以杂交春石斛(Dendrobium.Gold.Star“ORANGE ROYAL”×Dendrobium.Pink.Doll‘ELEGANCE’)为材料,在常温培养条件下,生长调节剂处理(454.5μmol/L浓度TDZ水溶液)诱导花芽,利用差异蛋白质组学技术对其花芽分化过程中蛋白质差异表达进行了研究。结果如下:
①成熟春石斛植株在处理10天时花芽已明显分化,表现为花芽膨大。
②建立了杂交春石斛花芽双向电泳体系,对样品制备,电泳过程等进行了优化:改良的酚抽提法,1:40水化液复溶,1.35mg上样量,24cm pH值3-10NL胶条,被动水化,恒功率等；获得了可识别约1400多个蛋白质斑点的双向电泳图谱,重复性好、分辨率高。
③研究了在TDZ诱导杂交春石斛花芽分化过程中蛋白质差异表达的变化。结果表明:78个蛋白在TDZ诱导后发生可重复变化,16个蛋白点在处理后蛋白点出现表达或消失,62个蛋白在处理前后表达量发生变化。经筛选,取70个差异显著蛋白质斑点进行MALDI-TOF/TOF-MS串联质谱分析,共获得61个较好的二级质谱图,通过数据库搜索,其中有49个蛋白质得到了较为可靠的鉴定。这些蛋白质主要与物质和能量代谢,应激响应,蛋白质合成,花粉传输,细胞分裂以及细胞内外信息传递等生物学功能相关。
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