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目的: 本实验将研究调控 microRNA-29b对食管鳞癌细胞 EC109增殖和细胞周期的影响。 实验方法: 通过向食管鳞癌细胞 EC109中转染含 microRNA-29b模拟物的mimic试剂或含microRNA-29b抑制物的inhibitor试剂,过表达或者沉默microRNA-29b在食管鳞癌细胞EC109中的表达水平,同时设置阴性对照组。然后采用实时荧光定量PCR、MTT检测(噻唑蓝比色法检测)、克隆形成实验、细胞周期测定用于研究调控microRNA-29b对食管鳞癌细胞EC109增殖及细胞周期的影响。 实验结果: 1.不同转染组 microRNA-29b的相对表达量:相对于对照组, EC109细胞在转染进microRNA-29b mimic后,microRNA-29b的表达水平升高(p<0.05),EC109细胞在转染进microRNA-29b inhibitor后,microRNA-29b的表达水平显著下降(p<0.01)。 2.不同转染组细胞增殖率:相对于对照组,EC109细胞在转染miR-29b-mi培养72小时后细胞活力显著低于对照组(p<0.01),而EC109细胞在转染进miR-29b-in培养72小时后,细胞活力显著高于对照组(p<0.01)。 3.不同转染组克隆形成率:相对于对照组,EC109细胞在转染进miR-29b-mi后,细胞克隆形成率显著低于对照组的细胞(p<0.01),而EC109细胞在转染进miR-29b-in后,细胞克隆形成率显著高于对照组的细胞(p<0.01)。 4、细胞周期检测:相对于对照组, EC109细胞在转染进miR-29b-mi后在G0/G1期的数量显著增多(p<0.01),S期的数量显著减少(p<0.01),G2/M期的数量无显著差别(p>0.05)。EC109细胞在转染进miR-29b-in后在G0/G1期的数量减少(p<0.05),在S期的数量显著增多(p<0.01),G2/M期的数量无显著差别(p>0.05)。 结论: 过表达食管鳞癌细胞EC109的microRNA-29b表达抑制细胞增殖和细胞分裂,沉默食管鳞癌细胞EC109中microRNA-29b表达促进细胞增殖和细胞分裂。