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目的:了解张家口地区儿童口咽部流感嗜血杆菌(Haemophilus infiuenza,HI)感染状况及其对常用抗生素的耐药情况,并对所分离出的流感嗜血杆菌进行同源性分析,为预防、减少、控制流感嗜血杆菌感染的发生提供科学依据。
方法:采集儿童口咽部咽拭子进行流感嗜血杆菌的分离,通过实验室常规分离培养,用V因子和X因子试验鉴定H阳性菌株,同时用聚合酶链反应(PCR)方法鉴定,进一步用生化技术分型,用cefinase纸片检测HI的β-内酰胺酶,用Kirby-Bauer法进行13种抗生素的体外药敏试验,最后用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术进行同源性分析。
结果:100份健康儿童标本中,共分离出HI31株,阳性率为31.0%,HI生物学分型以Ⅵ型、Ⅷ型为主,分别为32.4%,22.6%,β-内酰胺酶阳性5株,产酶率16.1%;128份呼吸道感染儿童标本中,共分离出HI49株,阳性率为38.3%,生物学分型以Ⅵ型、Ⅷ型为主,分别为38.8%,36.9%,β-内酰胺酶阳性19株,产酶率38.8%;31株健康儿童分离的HI对亚胺培南、头孢唑啉、氯霉素、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、环丙沙星、阿米卡星、四环素、阿莫西林-克拉维酸100%敏感。其中对磺胺甲恶唑-甲氧苄啶耐药率为38.7%,对红霉素耐药率为16.1%,对克拉霉素耐药率为29.0%,对氨苄西林耐药率为16.1%;49株呼吸道感染儿童分离的HI对亚胺培南、氯霉素、头孢克罗100%敏感,对头孢唑啉、氨苄西林-舒巴坦、环丙沙星、阿米卡星、四环素、阿莫西林-克拉维酸、磺胺甲恶唑-甲氧苄啶、红霉素、克拉霉素、氨苄西林的耐药率分别为为12.2%、10.2%、6.1%、2.0%、6.1%、6.1%、40.8%、42.9%、40.8%、42.9%。所分离的80株HI经RAPD扩增后均可获得数量不等的条带,条带数在1-8之间,分型率达92.5%,经聚类分析发现本地区HI在呼吸道感染儿童中存在着同型菌的流行趋势。
结论:
1.本地区儿童鼻咽部HI阳性率处于较高水平,生物学分型以Ⅵ型和Ⅷ型为主,与本地区10年前的研究结果相比生物型发生了改变。
2.HI对亚胺培南、头孢克罗、氯霉素具有较高的敏感性,而对磺胺甲恶唑-甲氧苄啶,氨苄西林,红霉素、克拉霉素耐药率较高,并且与本地区10年前的研究结果相比HI对氨苄西林的耐药率升高。临床应根据药敏试验合理选择抗生素。
3.RAPD技术具有分辨力强、分型率高、简便、快速、经济等优点,可广泛用于流感嗜血杆菌的同源性分析。