丹参酮ⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3凋亡及MMP-2、VEGF表达的影响

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huan2735
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察中药丹参脂溶性提取物之一丹参酮II A (Tan II A)对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和诱导凋亡的作用及侵袭转移相关基因MMP-2、VEGF表达的影响,并探讨其可能的作用机制,为中药提取物Tan IIA应用于临床预防、治疗卵巢癌提供理论依据。方法:倒置显微镜观察SKOV3细胞贴壁情况及生长状态,定时观察不同终质量浓度Tan IIA处理前后SKOV3细胞生长状态变化。MTT比色法检测人卵巢癌细胞SKOV3经Tan IIA药物处理后,细胞的增殖和凋亡情况,计算细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100%。实验重复三遍,绘制细胞生长抑制曲线,并用IC50软件计算药物作用细胞的半数抑制率(IC50)。流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,细胞以4×105的浓度接种于25cm2的培养瓶中,实验分空白对照组和实验组,其中实验组以4.0mg/L Tan IIA作用于人卵巢癌SKOV3细胞时间的长短分24h、48h、72h三个组,收集对照组和实验组的细胞,进行固定、染色,FCM上机检测细胞凋亡,测定细胞凋亡率,观察细胞周期。免疫荧光细胞化学法检测SKOV3细胞经4.0mg/L Tan IIA处理细胞48h后,与空白对照组相比,MMP-2、VEGF蛋白表达水平的改变。荧光半定量PCR法检测SKOV3细胞经不同终质量浓度的Tan IIA处理24h、48h、72h后,MMP-2mRNA、VEGF mRNA表达水平的改变.结果:倒置显微镜定时观察发现,TanⅡA对人卵巢癌SKOV3细胞的生长具有抑制作用,并且随药物作用时间的延长和药物浓度的增加,细胞出现不同程度的凋亡。MTT法结果显示,TanⅡA对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖具有抑制作用,且TanⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用呈时间和剂量依赖性,与对照组相比及各组之间相比均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪显示,经4.0mg/L TanIIA处理后的SKOV3细胞,实验组较对照组G0/G1期细胞数量增多,而S期细胞数量减少。FCM定量显示,0、24、48、72 h的凋亡率分别为8.3%、21.9%、28.5%、38.5%,凋亡细胞随作用时间延长而逐渐增多,与对照组比较24h、48h、72h的凋亡率增高均有统计学意义(F=779.872,P<0.05)免疫荧光细胞化学法显示,经4 mg/L TanⅡA作用48 h后,对照组阳性细胞轮廓清晰、分布均匀、数量较多,染色深,呈强荧光绿,实验组阳性细胞数明显减少,染色明显减弱,且MMP-2蛋白表达下降尤为显著,差异均具有统计学意义(t分别为17.432、11.043,均P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,在不同浓度TanⅡA作用于SKOV3细胞48h后,随着药物浓度的增加,MMP2、VEGF mRNA表达逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05),且各浓度组间比较差异有统计学意义(MMP-2,F=166.819;VEGF,F=113.958,均P<0.05);在终质量浓度为4.0mg/L的TanⅡA处理细胞24、48、72 h时,MMP2、VEGF mRNA表达逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05),且各组间比较差异有统计学意义(MMP-2, F=41.303; VEGF, F=77.916,均P<0.05)结论:TanⅡA对人卵巢癌SKOV3细胞有明显的增殖抑制及诱导凋亡作用;TanⅡA可下调细胞MMP-2、VEGF的表达,进而可能降低癌细胞的侵袭转移能力;TanⅡA具有治疗卵巢癌的潜力,可进一步为抗肿瘤新药研发提供理论依据。
其他文献
目的:低钠血症是最常见的电解质紊乱。本文将通过回顾性分析临床资料来探讨住院低钠血症患者的占比、患病时间、住院天数、首发症状、基础疾病、转归情况、血钠与其他实验室
水利工程是社会发展的重要组成部分之一,在当前的发展过程中,结合全新的科学技术,可以提高水利工程的整体质量。在目前水利工程渠道工程建设中,存在较多的问题,防渗技术可以
<正>内容提要●伤口处理步骤●伤口愈合类型●伤口愈合分期●伤口愈合基础知识●伤口护理新理念
会议
在中国古代诗歌三大体式中,散曲晚出,虽能兼容诗词艺术而别开新面,然而,一方面因为散曲家大多是被社会边缘化的文士,其散曲创作在当时难以成为主流文学,自然得不到应有重视;另一方面
纳米流体是纳米颗粒在传统流体介质中的悬浮液。纳米流体由于其异常高的热导率,在强化传热方面具有广阔的应用前景。目前,文献中纳米流体导热系数数据存在较大差异。相比之下,纳米流体受到的关注非常有限,刚开始引起人们的注意,此外对纳米流体的导热性增强机制尚未完全理解。因此,反应堆的设计者可能会忽略纳米流体对反应堆堆芯传热影响的数据。基于以上原因,本文通过对纳米流体的模拟来提高核燃料棒束与冷却剂之间的传热。本
采用静态仓研究鸡粪和城市生活垃圾好氧堆肥过程中温度、pH值、NH4+-N、NO3——N、水溶性总氮和水溶性有机质等腐熟度指标的变化规律。通过MPC、MPC1、MPC2三组实验结果表明,
<正>玉米是世界三大主要粮食作物之一,也是我国三大主要粮食品种之一,产量约占全国粮食总产量的35%。吉林省位于"黄金玉米带",地处"黑土地之乡",生产条件得天独厚,适宜大面积
近来,有研究表明REGy作为一种蛋白酶激活因子在癌症发生发展过程中起到重要作用。而迄今为止,已知的REGy靶蛋白寥寥无几,与REGy功能相关的信号通路亦不清晰。而公开的人体癌
我国保障性住房是社会保障的重要内容之一,作用在于解决低收入人群住房难的问题.在我国土地财政转型的现实下,依靠土地出让金按比例划拨作为日益增长的保障性住房需求的重要