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目的:观察中药丹参脂溶性提取物之一丹参酮II A (Tan II A)对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和诱导凋亡的作用及侵袭转移相关基因MMP-2、VEGF表达的影响,并探讨其可能的作用机制,为中药提取物Tan IIA应用于临床预防、治疗卵巢癌提供理论依据。方法:倒置显微镜观察SKOV3细胞贴壁情况及生长状态,定时观察不同终质量浓度Tan IIA处理前后SKOV3细胞生长状态变化。MTT比色法检测人卵巢癌细胞SKOV3经Tan IIA药物处理后,细胞的增殖和凋亡情况,计算细胞抑制率=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100%。实验重复三遍,绘制细胞生长抑制曲线,并用IC50软件计算药物作用细胞的半数抑制率(IC50)。流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,细胞以4×105的浓度接种于25cm2的培养瓶中,实验分空白对照组和实验组,其中实验组以4.0mg/L Tan IIA作用于人卵巢癌SKOV3细胞时间的长短分24h、48h、72h三个组,收集对照组和实验组的细胞,进行固定、染色,FCM上机检测细胞凋亡,测定细胞凋亡率,观察细胞周期。免疫荧光细胞化学法检测SKOV3细胞经4.0mg/L Tan IIA处理细胞48h后,与空白对照组相比,MMP-2、VEGF蛋白表达水平的改变。荧光半定量PCR法检测SKOV3细胞经不同终质量浓度的Tan IIA处理24h、48h、72h后,MMP-2mRNA、VEGF mRNA表达水平的改变.结果:倒置显微镜定时观察发现,TanⅡA对人卵巢癌SKOV3细胞的生长具有抑制作用,并且随药物作用时间的延长和药物浓度的增加,细胞出现不同程度的凋亡。MTT法结果显示,TanⅡA对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖具有抑制作用,且TanⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用呈时间和剂量依赖性,与对照组相比及各组之间相比均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪显示,经4.0mg/L TanIIA处理后的SKOV3细胞,实验组较对照组G0/G1期细胞数量增多,而S期细胞数量减少。FCM定量显示,0、24、48、72 h的凋亡率分别为8.3%、21.9%、28.5%、38.5%,凋亡细胞随作用时间延长而逐渐增多,与对照组比较24h、48h、72h的凋亡率增高均有统计学意义(F=779.872,P<0.05)免疫荧光细胞化学法显示,经4 mg/L TanⅡA作用48 h后,对照组阳性细胞轮廓清晰、分布均匀、数量较多,染色深,呈强荧光绿,实验组阳性细胞数明显减少,染色明显减弱,且MMP-2蛋白表达下降尤为显著,差异均具有统计学意义(t分别为17.432、11.043,均P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,在不同浓度TanⅡA作用于SKOV3细胞48h后,随着药物浓度的增加,MMP2、VEGF mRNA表达逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05),且各浓度组间比较差异有统计学意义(MMP-2,F=166.819;VEGF,F=113.958,均P<0.05);在终质量浓度为4.0mg/L的TanⅡA处理细胞24、48、72 h时,MMP2、VEGF mRNA表达逐渐下降,与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05),且各组间比较差异有统计学意义(MMP-2, F=41.303; VEGF, F=77.916,均P<0.05)结论:TanⅡA对人卵巢癌SKOV3细胞有明显的增殖抑制及诱导凋亡作用;TanⅡA可下调细胞MMP-2、VEGF的表达,进而可能降低癌细胞的侵袭转移能力;TanⅡA具有治疗卵巢癌的潜力,可进一步为抗肿瘤新药研发提供理论依据。