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目的:本课题通过动物实验初步评估痹证宁方治疗CIA模型大鼠的作用,进一步探讨痹证宁方及联合甲氨蝶呤治疗风寒湿痹证类风湿关节炎的疗效及基于JAK-STAT信号通路的作用靶点,为痹证宁方及联合甲氨蝶呤的临床应用提供实验依据。方法:1.40只Wistar大鼠建立CIA模型,分为8组,分别给予生理盐水、痹证宁方低、中、高剂量、甲氨蝶呤及甲氨蝶呤联合低、中、高剂量痹证宁方,灌胃4周,每周观察关节炎指数评分,初步评估痹证宁方的作用以及初步筛选痹证宁方联合甲氨蝶呤的最佳配比。2.70只Wistar大鼠随机分为7组,除正常组外均建立风寒湿痹证CIA模型。给药组分别给予痹证宁方低、中、高剂量、甲氨蝶呤及其联合中剂量痹证宁方,给药4周,观察大鼠体质量、关节肿胀度的变化,检测血清炎症因子CRP、ESR的含量,取滑膜组织用ELISA法检测IL-6、MMP-3、MMP-9的水平。3.通过Western blot检测关节滑膜组织中SOCS1、SOCS3、PIAS3、P-STAT3蛋白表达水平以及荧光定量PCR检测滑膜组织JAK3、STAT3 mRNA含量水平。结果:1.给药2-4周,痹证宁方各组、甲氨蝶呤组及中西医结合各组均能使关节炎指数评分降低(P<0.01),其中甲氨蝶呤联合痹证宁方中剂量组关节炎指数评分最低(P<0.01)。痹证宁方中剂量组较低、高剂量组抑制炎症作用明显(P<0.05,P<0.01)。2.痹证宁方中剂量组、甲氨蝶呤组、中西医结合组均能改善CIA大鼠的体重、降低滑膜组织IL-6水平(P<0.01),各给药组能减轻关节肿胀度程度(P<0.01),血清CRP、ESR含量下降(P<0.01),滑膜组织MMP-3、MMP-9水平下降(P<0.01),而中西医结合组作用更显著(P<0.01)。痹证宁方给药组中,中剂量组优于低、高剂量组(P<0.05,P<0.01)。3.给药组均可促进滑膜组织SOCS1、SOCS3、PIAS3蛋白的表达(P<0.01),抑制P-STAT3蛋白(P<0.01)、JAK3、STAT3 mRNA的表达(P<0.01)。在给药组中,中西医结合组明显优于其它给药组(P<0.01)。痹症方给药组中,中剂量组优于低、高剂量组(P<0.05,P<0.01)。结论:痹证宁方联合甲氨蝶呤治疗风寒湿痹证CIA模型可降低关节炎指数评分、改善大鼠体质量、减轻关节肿胀度、降低血清CRP、ESR含量及滑膜组织IL-6、MMP-3、MMP-9水平,有着明显抑制炎症反应的作用。其作用机制可能是上调滑膜组织中SOCS1、SOCS3、PIAS3蛋白的表达,抑制P-STAT3蛋白及JAK3、STAT3 mRNA的过度表达,从而抑制JAK-STAT信号通路转导,抑制相应促炎细胞因子的转录。其中,痹证宁方中剂量组疗效可,联合甲氨蝶呤对于风寒湿痹证CIA疗效最佳,为临床应用治疗类风湿关节炎奠定了实验基础。