苍艾香薰油对上呼吸道常见致病菌的部分药效学研究

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目的:将导师临床经验方利用现代制剂工艺,研制成苍艾香薰油,并进行苍艾香薰油及组方药物的体外抑菌作用研究及毒理研究,探讨苍艾香薰油的作用机制,为下一步新药研发及临床运用提供部分实验依据。 方法:分别对组方药挥发油出油量进行测定及分析,采用正交试验设计法,确定苍艾香薰油的最佳制备工艺。体外抑菌预试试验:采用打孔法检测苍艾香熏油对金黄色葡萄球菌、甲型、乙型链球菌,肺炎链球菌各实验菌的体外抑菌作用,以氨苄西林制剂为阳性对照,初步求出其抑菌作用的量效关系。进一步实验:采用打孔法检测苍艾香熏油及组方药挥发油对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌,白色念珠球菌、铜绿假单胞菌各实验菌的体外抑菌作用,以左氧氟沙星及酮康唑制剂为阳性对照,分别初步求出其抑菌作用的量效关系。急性毒性试验:分别给予小鼠不同浓度的苍艾香薰油灌胃,找出最大致死量(Dm)及最小致死量(Dn),以0.8为稀释等级系数,在Dm与Dn之间设置5个剂量组,观察各组小鼠的外观、行为和毒性反应,并记录各组小鼠的死亡数,用改良寇氏法计算小鼠的LD50。呼吸道刺激性试验:将家兔固定于架上,用纸筒罩于兔头部,在纸罩内分别喷入不同剂量苍艾香薰油溶液、5%吐温-80溶液和生理盐水,每日3次,连续7天。停药后24小时处死家兔,肉眼观察动物组织、器官、呼吸道粘膜有无病理变化。 结果: 1.确定了苍艾香薰油的最佳制备工艺:采用水蒸气蒸馏法时,按比例称取苍术、艾叶、藿香、香薷、佩兰、丁香、花椒,加水8倍,浸泡4h,提取6h,收率约为1.64%(ml/g)。单味组方药物挥发油的提取实验中,加8倍量水,浸泡2小时,提取至不再出油为止:苍术挥发油得率为1.37%(ml/g);艾叶挥发油得率为1.13%(ml/g);花椒挥发油得率为2.85%(ml/g);佩兰挥发油得率为0.46%(ml/g);藿香挥发油得率为0.89%(ml/g);香薷挥发油得率为0.63%(ml/g);丁香挥发油得率为10.08%(ml/g)。2.预试试验中,苍艾香熏油对金黄色葡萄球菌、甲型、乙型链球菌,肺炎链球菌均有体外抑菌作用,并且在一定剂量范围内呈量效关系。进一步试验中,苍艾香熏油对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌,白色念珠球菌均有体外抑菌作用,并在一定剂量范围内呈量效关系。但对铜绿假单胞菌不敏感。金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、白色念珠球菌对受试单味组方药的挥发油均敏感;铜绿假单胞菌仅对花椒挥发油敏感。3.急性毒性试验:小鼠灌胃给苍艾香薰油的LD50为3.47ml/kg,相当于临床儿童最大使用剂量(按临床拟用制剂规格10ml含挥发油3%,拟用量为0.0168ml/天,儿童体重按12公斤计)2478.57的倍。95%可信限区间为3.09~4.58 ml/kg。中毒表现主要为自发活动减少,踡缩,直至死亡。动物在35min后开始出现死亡,经大体解剖肉眼观察,主要脏器未见明显异常改变。实验结束后处死小鼠,肉眼观察各主要脏器也未见异常。4.呼吸道刺激性试验:苍艾香薰油溶液对家兔呼吸系统无明显的刺激作用。 结论:本研究结果表明,确定的苍艾香薰油的制备工艺,能提高挥发油的收率。苍艾香薰油对常见的上呼吸道致病菌金黄色葡萄球菌、甲型、乙型链球菌,肺炎链球菌、白色念珠球菌有很好的体外抑制作用,并在一定剂量范围内呈量效关系,且复方挥发油抑菌作用优于单味挥发油。小鼠苍艾香薰油灌胃给药,对小鼠有一定的急性毒性,但较临床拟用剂量而言,初步认为是较安全的;临床拟用制剂规格中的药物含量对呼吸道粘膜无明显刺激性。
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