背景目前,全球约有8亿人受慢性肝病的影响,慢性肝病已成为全球公共卫生关注的主要问题之一,进展性肝纤维化常常导致肝硬化,这与全世界的高发病率和死亡率密切相关。值得注意的是,各种病因导致的慢性肝病其病理均涉及慢性实质损伤、炎症反应、肝纤维化和创面愈合反应的持续激活,其中肝纤维化最为重要,因而肝纤维化也成为各种慢性肝病的重要病理特征,其机制涉及多个信号通路,主要病理改变为肝内弥漫性细胞外基质过度沉积,引起细胞外基质降解失衡,其发生机制中,肝星状细胞首先激活并增殖,产生大量细胞外基质。大量研究证实,多种细胞因子能够激活肝星状细胞,血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)是肝星状细胞中有效的有丝分裂增殖细胞因子之一,对肝星状细胞的增殖、迁移、趋化等发挥关键作用。褪黑素是一种天然的抗氧剂,现已证实,其对多种肝纤维化具有保护作用,但作用机制尚不清楚。本文旨在讨论褪黑素对肝星状细胞活化的影响及机制。实验方法本实验用浓度梯度为1nmol/L、1μmol/L、0.1mmol/L的褪黑素探讨其对PDGF(10ng/ml)诱导的大鼠HSC-T6细胞活化的影响,细胞培养24h后按照以下方法分6组:(1)对照组:加入PBS(2)模型组:10ng/ml的PDGF。(3)褪黑素低浓度组:10ng/ml的PDGF和等体积的1nmol/L的褪黑素(4)褪黑素中浓度组:10ng/ml的PDGF和等体积的1umol/L的褪黑素(5)褪黑素高浓度组:10ng/ml的PDGF和等体积的0.1mmol/L的褪黑素(6)抑制剂组:10ng/ml的PDGF和等体积的AG490。孵育48h后,MTT检测各组细胞的增殖情况,免疫组化和Western Blot检测各组P-JAK2、P-STAT3蛋白。结果1.MTT实验结果显示,模型组OD值较对照组显著增加(P<0.01);褪黑素低、中、高浓度组及抑制剂组的OD值较模型组呈下降趋势(P<0.01),且随着褪黑素浓度升高下降趋势越明显。2.细胞免疫组化实验结果显示,P-JAK2蛋白主要在胞质中表达,而P-STAT3蛋白主要在胞核中表达。与对照组比较,模型组中P-JAK2、P-STAT3蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,褪黑素各剂量组及抑制剂组P-JAK2、P-STAT3蛋白表达明显减少(P<0.05),且褪黑素浓度越高,细胞中P-JAK2、P-STAT3表达量越低。3.Western Blot实验结果显示,与对照组比较,模型组HSC-T6细胞中P-JAK2、P-STAT3蛋白的表达增强(P<0.01);与模型组比较,褪黑素低、中、高剂量组及抑制剂组P-JAK2、P-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05),并随褪黑素浓度升高蛋白表达量逐渐下降。结论褪黑素可抑制PDGF诱导的肝星状细胞活化,其效应与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。