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目的本实验采用高脂饲料饲养SD大鼠建立实验性NASH大鼠模型,并给予威灵仙多糖灌胃干预,通过检测实验性NASH大鼠模型组、威灵仙多糖组、易善复组及空白组空腹血糖、空腹胰岛素、视黄醇结合蛋白4的含量,并统计分析各组胰岛素抵抗指数和血清视黄醇结合蛋白4水平的差异,以观察威灵仙多糖干预实验性NASH大鼠胰岛素抵抗的疗效,并探讨胰岛素抵抗与血清视黄醇结合蛋白4的相关性。方法建模方法：从50只清洁级健康雄性SD大鼠中随机抽取14只组成空白组,剩余的36只作为模型组。空白组用普通饲料喂养16周；模型组用高脂饲料(饲料配比：82.5%普通饲料+10%猪油+5%蛋黄粉+2%胆固醇+0.5%胆酸钠)喂养16周。然后在造模期间的第4周末随机选择空白组和模型组各1只、第8周末各1只、第12周末各2只、第16周末各2只,分别称量体重、肝湿重；计算肝指数；下腔静脉取血测定AST、ALT、TC、TG、空腹血糖、空腹胰岛素、视黄醇结合蛋白4的值,根据血糖及空腹胰岛素值计算胰岛素抵抗指数；于肝右叶中央部位取适量肝组织,行HE染色后在光镜下观察肝脏脂肪变、炎症和纤维化的情况,统计分析空白组和模型组大鼠血清中以上指标含量的差异,最后根据检测及观察的相关指标来判断实验性NASH大鼠模型是否成功建立。干预方法：实验性NASH大鼠模型成功建立后,将余下的30只原模型组大鼠随机分为模型组、易善复组和威灵仙多糖组,每组分别10只；余下的8只原空白组大鼠作为空白组。依次分别给予0.9%NS、易善复[195.4 mg/(kg.d)]、威灵仙多糖[50mg/(kg.d)]、0.9%NS配成3ml溶液,灌胃干预8周,密切观察各组大鼠的一般情况。8周后,4组大鼠下腔静脉取血检测空腹血糖、空腹胰岛素及视黄醇结合蛋白4的含量,统计分析各组上述指标的差异及胰岛素抵抗与血清视黄醇结合蛋白4的相关性。结果1、造模结果：1.1大鼠一般情况：模型组大鼠逐渐出现皮毛光泽度变差,活动量减少,食欲降低,大便质软、稀,饮水增多,而空白组大鼠普遍毛发光整,活动力强,进食饮水量无异常,大便性状正常。1.2大鼠的体重、肝湿重和肝指数：模型组和空白组体重均逐渐增加,但差异无统计学意义(P=0.351)；模型组和空白组肝湿重均逐渐增加,两组差异有统计学意义(P=0.011)；模型组肝指数呈逐渐上升趋势,空白组肝指数未见明显上升趋势,两组差异有显著统计学意义(P=0.000)。1.3大鼠空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment of insulin resistance, HOMA-IR):模型组血糖呈上升趋势,空白组血糖未见明显上升趋势,但两组差异无统计学意义(P=0.305)；模型组空腹胰岛素呈逐渐上升趋势,空白组空腹胰岛素未见明显上升趋势,两组差异有统计学意义(P=0.020)；模型组HOMA-IR呈逐渐上升趋势,空白组HOMA-IR未见明显上升趋势,两组差异有统计学意义(P=0.047)。1.4大鼠血清视黄醇结合蛋白4 (Retinol binding protein 4, RBP4):模型组RBP4水平呈上升趋势,空白组RBP4未见明显上升趋势,两组差异有统计学意义(P=-0.049)1.5大鼠转氨酶和血脂指标：模型组的AST、ALT、TG呈逐渐升高趋势,而TC在4周末起基本维持稳定,空白组的AST、ALT、TC、TG未见明显升高。模型组的AST、ALT、TC和TG都明显高于空白组,两组的AST、ALT、TC、TG相比较,差异都有统计学意义(P=0.000,P=0.002,P=0.000,P=-0.023)。1.6大鼠肝脏观察：肉眼观察：模型组肝脏表面光泽度欠佳,色淡黄,体积增大,肝脏边缘稍钝；空白组肝脏表面细腻光滑,色粉红,体积适中,肝脏边缘锐。镜下观察：模型组肝脏组织学表现呈现典型正常—非酒精性脂肪肝—非酒精性脂肪性肝炎的病变规律。16周末时,模型组肝脏脂肪变分度为Ⅳ度(F4),肝脏炎症分级为2级(G2),肝纤维化程度分期为0期(S0),NAS积分为8分,模型组和空白组间肝脏脂肪变分度、肝脏炎症分级、NAS积分的差异均有统计学意义(P=0.005,P=0.021,P=0.000)。2、干预结果：2.1大鼠一般情况：经灌胃干预后,易善复组、威灵仙多糖组大鼠食欲欠佳,活动力,皮毛不光整情况较模型组有所改善；但各组大鼠体重增加都相对放缓；空白组大鼠进食饮水量无异常、活动力正常、毛发较为光整。模型组、易善复组、威灵仙多糖组大便性状仍旧软、稀,饮水仍较多,三组间无明显差别且与造模期间无明显区别；空白组大便性状正常。2.2大鼠HOMA-IR:空白组与模型组存在显著性统计学差异(P=0.000)；威灵仙多糖组与模型组存在显著性统计学差异)(P=0.000)；易善复组与模型组存在显著性统计学差异(P=0.000)；空白组、威灵仙多糖组和易善复组两两间差异均无统计学意义(P>0.05)。2.3大鼠血清RBP4水平：空白组与模型组RBP4存统计学差异(P=0.006);威灵仙多糖组与模型组存在统计学差异(P=0.006)；易善复组与模型组存在统计学差异(P=0.006)；空白组、威灵仙多糖组和易善复组两两间差异均无统计学意义(P>0.05)。2.4 HOMA-IR与血清RBP4呈正相关关系(r=0.541,P=0.001)。结论1.高脂饮食饲养SD大鼠16周,可建立NASH大鼠模型但不伴有肝纤维化。2.实验性NASH大鼠存在胰岛素抵抗。3.实验性NASH大鼠血清视黄醇结合蛋白4与胰岛素抵抗呈正相关。4.威灵仙多糖和易善复可以有效改善实验性NASH大鼠的胰岛素抵抗,二者疗效相当。5.威灵仙多糖无明显毒副反应。