【摘 要】
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花椰菜是重要的蔬菜作物,对其染色体进行核型分析及显微分离,可为花椰菜DNA文库和遗传图谱的构建以及重要基因的分离提供重要的指导作用。本文以“福州60天”花椰菜品种为材料,
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花椰菜是重要的蔬菜作物,对其染色体进行核型分析及显微分离,可为花椰菜DNA文库和遗传图谱的构建以及重要基因的分离提供重要的指导作用。本文以“福州60天”花椰菜品种为材料,对以下内容进行了研究。 1.对花椰菜染色体制片技术进行优化,结果表明: (1)酸解以60℃1N HCl解离10min左右效果较好,常温下用1N HCl解离12~16min也得到了较好的效果。 (2)根尖长度以0.5cm左右时取材较好。 (3)预处理以8-羟基喹啉、饱和对二氯苯、放线菌酮、α-溴萘处理的染色体形态比较好、染色体易于辨别,尤其以8-羟基喹啉处理的效果最好。经8-羟基喹啉处理后染色体具有分散、缢痕显示清晰、随体染色体更易于辨认等优点。 (4)经1~1.5h酶解后所制得的片子,染色体容易充分展开,着色较深,清晰度好,背景没有细胞壁和细胞质的干扰,适合于染色体显微分离。 2.分析了“福州60天”花椰菜的核型,结果表明:花椰菜体细胞染色体数2n=18,染色体绝对长度为2.05~3.90μm,第7对染色体为随体染色体,其臂比值为2.01;最长染色体与最短染色体相对长度变化范围为7.97%~15.17%,大小之间相差7.20%;最长与最短染色体的相对长度比为1.90,平均臂比为1.62;第1、7两对染色体臂比介于1.71~3.00,为近中部着丝点染色体(sm),其余7对染色体臂比介于1.01~1.70,为中部着丝点染色体(m);核型公式为2n=18=14m+4sm(2SAT),染色体属2A型,属对称性核型。 3.在核型分析的基础上,对花椰菜具随体的单条染色体进行了识别,并成功地将具随体的第7号染色体和其它染色体中的任一条染色体进行了显微分离。为花椰菜染色体的微切割、微分离和微克隆奠定了基础。
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