松材线虫病是当前世界上重大森林病害。病原是松材线虫（Bursaphelenchusxylophilus）（Steiner&Buhrer，1934），主要为害黑松，马尾松，赤松，火炬松等10多种松树。松材线虫病的防治办法，目前以物理，化学防治为主，生物防治为辅，直接针对松材线虫进行生物防治仍有较大难度。本实验室近几年一直研究的Esteya vermicola真菌，是从国外引进的松材线虫内寄生天敌真菌，研究表明该真菌对松材线虫有很高的侵染活性，因此对松材线虫病的防控有很大的生防潜力。本研究探索了松材线虫病发病环境中微生物的种类，数量；以及不同时间，不同纬度，不同发病情况的松林间，优势微生物的异同；并分析了两棵黑松发病前后与树体内微生物种类和数量的变化，可为后续研究微生物防治松材线虫病提供参考。E. vermicola (Ophiostomataceae，长喙壳科)是松材线虫内寄生真菌，对松材线虫具有很高的感染力。Wang等对该真菌已做了大量研究工作，发现它有很大的生防价值，目前该菌已有成型的批量生产方法。到目前为止该真菌的检测依然是基于传统方法，即采样后显微观察和形态鉴定，且以检测半月型孢子为主。本研究通过在实验室内对该菌进行了遗传相近微生物检测，菌株丰度检测，DNA浓度检测研究。探索出了一种特异性针对某个菌种的，高效，快速，准确的分子检测方法的建立流程。结果证实，基于核酸序列微生物鉴定方法相比传统微生物鉴定方法，具有高效，精准，快速，批量化等优点。FTA-DNA直接提取法是一种快捷，简单的DNA提取方法，不但可以节省时间，还能减少提取过程中各种因素对核酸的破坏。FTA-DNA直接提取法不仅操作简单成本低廉，可有效避免DNA提取过程中的生物大分子的交叉污染现象，还具有省时省力，简单高效等优点。本研究针对E. vermicola真菌侵染线虫的特性，判断该菌的基因组内含有侵染线虫体表所必须的几丁质酶基因，通过实验设计出一对针对几丁质酶功能基因的通用特异性引物。使用这对引物从E. vermicola菌的基因组DNA序列中扩增出一段几丁质酶基因序列，而后根据这段序列得到一对针对E. vermicola菌的特异性引物，并结合FTA-DNA直接提取法，成功建立了一种特异性针对E. vermicola菌，高效，快速，准确的分子检测方法。