2型髓系细胞触发受体(Triggering receptor expressed on myeliod cells2，TREM2)是中枢神经系统(central nervous system，CNS)中主要表达于小胶质细胞表面并参与机体固有免疫的一种受体蛋白，与其接头蛋白酪氨酸激酶结合蛋白(DNAX activating protein of12 kDa，DAP12)形成TREM2/DAP12复合物，从而调节小胶质细胞中的炎症反应和吞噬功能。TREM2属于Ⅰ型跨膜蛋白，其胞外段经过蛋白酶切割后产生可溶形式TREM2（soluble TREM2，sTREM2）并释放至胞外。早期研究发现TREM2的突变导致NHD(Nasu-Hakola Disease)，最近全基因组关联分析(Genome-wide association study, GWAS)发现，TREM2编码区的突变显著增加罹患阿尔茨海默症(Alzheimers Disease, AD)的风险，其中R47H突变的风险系数与apoE4相似。随后的研究表明，TREM2的突变还与额颞叶痴呆（frontotemporal dementia，FTD）、帕金森症(Parkinsons disease，PD)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis，ALS）等神经退行性疾病相关。这表明TREM2在神经退行性疾病中发挥着重要作用，但是TREM2突变如何加剧神经退行性疾病发生风险还需要进一步研究。APOE(apolipoprotein E)是最早被发现与晚发型AD相关的基因，主要有三种基因型:ε2、ε3、ε4，分别编码apoE2、apoE3和apoE4蛋白。ε4作为晚发型AD的风险因子，其具体机制还不是很清楚。　　在本研究中，我们首先构建了TREM2胞外段(sTREM2，1-171 aa)及疾病相关突变（包括R47H、R62H两个AD相关突变及Y38C、T66M两个FTD相关突变），通过在HEK293T上表达并从培养基中纯化这些蛋白。我们发现，Y38C和T66M突变的sTREM2胞外水平极低，这表明Y38C和T66M突变可能影响sTREM2蛋白的分泌从而导致功能异常。接着，我们发现sTREM2野生型(wildtype，WT)能够增加小胶质细胞分泌的促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平。但是，与sTREM2 WT相比，sTREM2 T66M增加的炎症因子水平显著升高，而sTREM2 R47H和R62H表现出较弱的促炎作用。然后，我们探讨了sTREM2突变体对野生型和Trem2(knockout，KO)原代小胶质细胞凋亡的影响，TUNEL实验表明sTREM2 WT能够抑制细胞凋亡，但是， sTREM2 R47H、 R62H和Y38C表现出较弱的抗凋亡作用。最近，两个研究团队同时揭示apoE可以结合TREM2的胞外段从而作为TREM2的一个新配体。我们细致地探讨了apoE与TREM2结合的特点。通过表面固相结合实验，发现apoE3(10nM)与TREM2结合的解离常数为150.8nM。同时我们发现，R47H、R62H、Y38C、T66M突变形式的TREM2与apoE3的亲和性显著降低。通过对胞外不同长度的TREM2分析，我们证实了apoE主要结合在TREM21-71氨基端序列上。通过分析该区段氨基酸特点构建了TREM2胞外正电荷氨基酸突变成丙氨酸的突变(K42A、R46A、R47A、K48A、R52A、K57A)，发现正电荷氨基酸突变的sTREM2与apoE3的亲和力降低，说明apoE与TREM2的结合主要通过静电相互作用，TREM2的精氨酸和赖氨酸对于二者的结合起到关键作用。　　本研究证实了疾病相关的TREM2突变影响了其在细胞中的转运及sTREM2的分泌，并且发现这些突变影响了sTREM2在炎症和凋亡中的功能，我们证实这些突变降低了其与配体apoE的亲和力。总之，通过对TREM2突变增加神经退行性疾病发生风险的作用机制进行细致探讨，可以了解sTREM2如何参与神经退行性疾病的发生发展及疾病进程，也可以为靶向sTREM2的神经退行性疾病药物研发提供理论基础。