背景与目的子痫前期是妊娠期妇女特有的疾病之一,是导致孕产妇及围产儿发病和死亡的重要原因之一,其病因及发病机制至今尚未完全阐明,目前比较公认的子痫前期的病理机制主要为胎盘缺血缺氧、血管内皮损伤及凝血异常。溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)是一种脂类信号分子,主要通过G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors, GPCRs)发挥多种生物学作用,LPA的三个主要特异性受体为LPAR1-3,即内皮分化基因(endothelial differentiation gene,Edg)Edg2、Edg4、Edg7。近年来研究发现LPA可来源于多种细胞,但主要来源于活化的血小板(Platelet, PLT),可以促进PLT聚集及血栓形成,与凝血功能异常、内皮损伤及血管硬化等有关。研究表明子痫前期患者外周静脉血中PLT明显低于正常晚期妊娠妇女,其导致产后出血、DIC及新生儿死亡率明显升高,病因尚不清楚。我们前期的研究发现子痫前期患者血浆LPA水平及胎盘组织中Edg4、Edg7蛋白表达水平明显升高,并与疾病的轻重程度相关；另有研究显示Edg4、Edg7主要与细胞增殖及肿瘤发生发展有关,而Edg2则与细胞凋亡有关,重度子痫前期患者胎盘绒毛细胞中存在明显的凋亡现象。LPA的异常升高是否于子痫前期患者PLT减少有关,以及Edg2在子痫前期胎盘组织中的表达情况至今未见报道。本研究通过：(1)对40例子痫前期患者血浆LPA及PLT水平进行检测,分析LPA与PLT的关系；(2)采用免疫组织化学法(SP法)及RT-PCR技术检测40例子痫前期患者胎盘组织中Edg2蛋白及mRNA的表达水平,并与正常晚孕组进行对比,分析Edg2在胎盘组织中的表达以及与子痫前期发生发展的关系。材料与方法1研究对象选取郑州大学一附院2010年11月-2011年5月收治的子痫前期患者40例(其中子痫前期轻度组20例、子痫前期重度组20例)为实验组,子痫前期的诊断标准参考丰有吉主编的《妇产科学》第2版妊娠期高血压疾病的分类标准；选取同期入院20例正常晚期妊娠妇女设为对照组。所有研究对象均排除慢性高血压、炎症性疾病、心肾疾病等,对照组无任何妊娠期并发症。所有对象分娩方式均为剖宫产,均无胎膜早破及感染等征象。2实验方法采用生化法检测各组患者血浆LPA水平,用五分类法测定血中PLT值。采用免疫组织化学法(SP法)RT-PCR技术分别检测子痫前期组和对照组胎盘组织中Edg2蛋白和mRNA的表达水平。3统计学分析用SPSS17.0软件进行统计分析,数据以x±s表示,各组计数资料采用χ2检验、校正的χ2检验,计量资料采用单因素方差分析(进行正态性检验和方差齐性检验),两两比较用LSD-t检验,相关性分析采Pearson统计学处理,以a=0.05或a’=0.0167为检验水准,以P<0.05或P<0.0167为差异有统计学意义。结果1各组血浆LPA水平及PLT计数1.120例正常晚孕妇女的血浆LPA平均值(3.375±0.178)μmo1/L,大于临界值3.2μmol/L,子痫前期组血浆LPA水平明显升高,分别为：子痫前期轻度组(6.093±0.203)μmol/L、子痫前期重度组(9.075±0.144)μmol/L。运用单因素方差分析进行组间比较,结果显示3组间有统计学差异(F=5082.452,P<0.001)；运用LSD-t检验进行两两比较,结果显示：子痫前期各组血浆LPA水平显著高于对照组(P<0.001),其重度组与轻度组比较,差异也有统计学意义(P<0.000)。1.2正常晚孕妇女的PLT平均值为(234.80±24.27)x109/L,子痫前期组PLT分别为：轻度组(198.50±25.89)-109/L、重度组(105.65±25.359)x109/L,与正常晚孕组相比,差异具有统计学意义(F=148.904,P<0.001),且随着病情加重,PLT明显下降。1.3LPA和PLT相关性分析：LPA与PLT在正常晚期妊娠组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组中均呈负相关(r1=-0.973,P<0.001； r2=-0.966,P<0.001；r3=0.975,P<0.001)。2各组胎盘组织中Edg2蛋白的表达子痫前期组和对照组胎盘组织中均可检测到Edg2蛋白的表达,主要表达于胎盘组织绒毛滋养叶细胞的细胞浆和细胞膜,镜下可见棕黄色颗粒。3组阳性表达率分别为：正常晚孕组20%(4/20)、子痫前期轻度组70%(14/20)、子痫前期重度组85%(17/20)。子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘组织中Edg2蛋白阳性表达率明显高于正常晚孕组,差异有统计学意义((χ2=10.101,P=0.001；χ2=16.942,P<0.001),子痫前期轻度组与子痫前期重度组患者胎盘组织中Edg2蛋白阳性表达率相比较,差异无统计学意义(P=0.225)3各组胎盘组织中Edg2mRNA的表达子痫前期胎盘组织中Edg2mRNA的表达明显高于正常孕妇,差异有统计学意度。各组胎盘组织中Edg2mRNA的相对表达量分别为：对照组(0.256+0.028)、子痫前期轻度组(0.578±0.036)、子痫前期重度组(0.955±0.039)。用单因素方差分析进行组间比较,结果显示3组间有统计学差异(F=1961.276,P<0.001)；子痫前期患者胎盘组织中Edg2mRNA表达显著高于对照组(P<0.001),其重度组与轻度组比较,差异有统计学意义(P<0.000)结论1.子痫前期患者血浆中LPA水平较正常孕妇明显升高,且与疾病的严重程度有关,提示LPA的异常升高可能与子痫前期的发生发展相关。2.子痫前期患者PLT较正常孕妇明显降低,且与血浆LPA呈负相关,提示子痫前期患者PLT减少可能与LPA有关。3.子痫前期患者胎盘组织中Edg2蛋白及mRNA表达水平明显升高,且与疾病的严重程度有关,提示Edg2异常高表达可能参与了子痫前期胎盘组织病理变化。