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目的:研究内毒素、孕酮及其拮抗物对妊娠小鼠子宫内巨噬细胞的影响以及中药石韦对内毒素诱发流产小鼠的保护作用。
方法:(1)在内毒素处理的实验中,将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组又分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组于妊娠第六天(D6)分别腹腔注射1μg、2μg、4μg剂量的内毒素,48小时后用酶组织化学染色方法观察子宫内巨噬细胞的数量和分布。(2)在石韦抗内毒素流产实验中,实验孕鼠分A、B、C组,其中A为对照组,B、C组分别于妊娠第4、5、6、7天灌以0.5g的石韦水煎剂并于妊娠6天对C组腹腔注射内毒素,妊娠八天观察小鼠流产情况并用酶组织化学方法显示子宫巨噬细胞的变化。(3)在孕酮及其拮抗物实验中,分别给于小鼠皮下注射200μg孕酮和666μg RU486,对照组以等量油代替。于孕4天注射后的12、24、36 h和孕10天注射后的4、8、12、24、36h后观察妊娠结果,同时以免疫组织化学方法和酶组织化学方法检测子宫内的CD14和巨噬细胞的变化。
结果:(1)实验组与对照组相比较,实验Ⅰ、Ⅲ组子宫内巨噬细胞的数量明显增多(p<0.001),而实验Ⅱ组与对照组相比较没有明显变化(p>0.05)。但是巨噬细胞在分布上发生了变化,环肌外层巨噬细胞数量减少,而环肌内层和内膜的巨噬细胞数量明显增多(p<0.05)。(2)石韦使内毒素处理小鼠的流产率从75%降至30%;但是石韦组增加了巨噬细胞的数量,使环肌外侧和对照有明显增多(p<0.05)。(3)孕4d,注射RU486可以完全阻止胚泡的着床,且注射后12~36 h有大量的巨噬细胞涌入子宫内膜、肌层和肌间血管层,细胞数量极显著地高于对照组(p<0.001)。注射孕酮后发现在12小时肌间层巨噬细胞数量增加(p<0.05)。孕10 d,RU486处理可以导致小鼠大多数胚胎吸收,并在处理后4~36 h子宫巨噬细胞的数量和分布发生急剧的变化,孕酮处理后8小时数量上有所增加(p<0.05)。
结论:(1)内毒素使妊娠小鼠子宫内巨噬细胞数量增多,细胞向子宫内膜迁移,而不利于胚胎着床和维持。(2)石韦能在一定程度上抑制内毒素引起的流产,但并不是石韦的抑制巨噬细胞效应起作用。(3)外源性孕酮对妊娠小鼠子宫巨噬细胞有短暂性影响;孕酮的缺失导致的小鼠妊娠早期的着床失败和妊娠中期的胚胎吸收与大量巨噬细胞侵入子宫有密切的关系。