目的：糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy，DR)是糖尿病(Diabetes mellitus，DM)常见的并发症之一，现已成为成人最主要的致盲因素，严重影响了患者的生活质量。目前，随着糖尿病发病率的逐年上升，DR的患病人数也在逐年增多。DR的发生机制复杂，目前尚不十分明确。关于DR的发病机制存在多种学说，如蛋白激酶C-甘油二酯、多元醇通路激活、晚期糖基化终末产物增多、氧化应激等均与DR的发病密切相关。已有研究证实，microRNAs在DR的发生机制中发挥了重要的调控作用。microRNAs是一类内源性非编码小RNA，主要通过抑制信使RNA(mRNA)的转录后翻译来调控蛋白表达。由于microRNAs在DR发病过程中的机制尚不明确，本实验通过分析糖尿病大鼠视网膜组织中的microRNAs进行表达谱分析，挑选出显著差异性表达microRNAs进行生物信息学分析，筛选可能与DR发生有关的microRNAs，用在线软件预测系统预测其靶分子，最终在基因水平上进一步揭示在DR发生的机制，为DR的预防和治疗提供全新的依据和思路。　　方法：　　1、制备糖尿病大鼠模型：选取体重介于200-220g之间的雄性SD大鼠30只，将其随机分为两组，其中对照组10只，糖尿病组20只。腹腔单次注射柠檬酸缓冲液60 mg/kg作为对照组，腹腔单次注射1％STZ60 mg/kg，作为实验组。72小时之后，检测SD大鼠尾部末端静脉血浆葡萄糖水平，若血糖值大于16.7mmol/L提示造模成功。　　2、制备糖尿病大鼠视网膜病变模型：造模成功后，在糖尿病SD大鼠8周、12周、16周时摘取眼球。其中一只眼球摘取后迅速剥离视网膜组织冻于液氮中保存用于microRNAs的检测，另一只眼球摘取后置于4%的多聚甲醛中固定，固定48小时后的眼球组织一部分制备成蜡块进行 HE染色测量视网膜厚度并对神经节细胞（Ganglion cell，GCL）的数量进行统计学分析，固定好的另一部分的眼球组织在解剖显微镜下剥离视网膜组织，放于37℃3%的胰蛋白酶中消化2小时，待其消化至一层透明的血管网时，将其捞至洁净的防脱载玻片上并进行过碘酸-雪夫反应（糖原染色、PAS）染色，观察视网膜血管的大致形态及典型改变进行分析。　　3、根据前期用HUVECs制备的氧化应激模型的microRNAs基因表达谱改变情况，结合分析人与大鼠种属差异性的情况，筛选可能与我们的研究相关的 microRNAs。　　4、用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)方法检测 microRNAs在 SD大鼠视网膜组织中的表达，并通过全基因组及代谢途径数据库（ Kyoto Encyclopedia of Genes,KEGG）分析异常表达microRNAs可能参与的信号通路。应用DAVID软件对异常表达的microRNAs进行靶基因预测并对可能参与的信号通路进行生物功能富集分析（Enrichment for Gene Ontology， GO）。　　5统计学方法：所有数据采用(x±s)表示。用IBM SPSS21.0软件进行数据处理，结果采用方差分析和独立样本 t检验进行统计学分析，以P<0.05为有统计学意义。　　结果：　　1、对照组10只SD大鼠的静脉血糖水平均在正常范围；实验组20只SD大鼠中一只死亡，剩余19只均造模成功，即静脉血糖水平大于16.7mmol/L。　　2、摘取对照组及实验组大鼠眼球后进行HE染色，测量视网膜层特定部位厚度后统计得出，实验组大鼠的视网膜厚度与正常对照组大鼠相比下降，GCL数量减少。PAS染色提示16周时实验组视网膜血管出现典型改变。其中造模成功后16周的实验组大鼠变化最明显，故在接下来的实验中提取造模成功后16周的实验组大鼠的视网膜组织进行microRNAs检测。　　3、microRNAs芯片结果：与正常对照组相比，实验组有5个显著差异表达的microRNAs(P<0.05)，综合分析microRNAs芯片结果，应用实时荧光定量PCR（ Real-time PCR）的方法检测实验组大鼠视网膜组织中miR-15b-5p，miR-17-5p，miR-195-5p，miR-497-5p，miR-106b-5p的表达，其中miR-15b-5p在大鼠视网膜组织中的相对表达量变化最为明显。　　4、miR-15b-5p的生物信息学分析结果显示：miR-15b-5p参与了钙离子信号通路、内吞作用、胰岛素信号通路、神经胶质瘤、2型糖尿病、粘附作用、前列腺癌等多个生物学过程。miR-15b-5p的靶基因主要参与了2型糖尿病、胰岛素信号通路及细胞凋亡等多种生物学过程的调控。　　结论：　　1、糖尿病大鼠的视网膜组织中存在多种microRNAs的改变，其中miR-15b-5p变化最为明显。　　2、miR-15b-5p表达的上调可能参与了DR的分子生物学过程。　　3、生物信息学分析结果揭示miR-15b-5p参与多种信号通路，可能参与了DR的发生和发展并作为机制之一。