离子液体双水相中金属离子对药物与蛋白质相互作用的影响

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离子液体双水相通常由有机阳离子与无机阴离子所组成,在低温或者室温条件下呈现为液体。与传统的聚合物-有机溶剂溶液双水相对比,该体系具有分相时间短、分离效率较高、不易发生乳化、相界面清晰、环境友好等优点,而且离子液体经过简单处理可以重复再利用。因此,离子液体双水相已经被广泛应用于萃取、提纯领域中。本文利用亲水性离子液体1-丁基-3-甲基溴代咪唑([Bmim]Br)和硫酸铵形成的双水相体系,进行研究离子液体双水相中金属离子对药物与蛋白质相互作用的影响。并综合利用荧光光谱、紫外吸收光谱法以及同步荧光光谱获取它们之间的相互作用一些信息,如药物与牛血清白蛋白的猝灭类型、作用力类型、结合常数、结合位点数、构象的变化、能量转移方式。这对于了解药物在体内的储存、运输情况,代谢及效果情况都有非常重要的意义。本论文分为以下五个章节:第一章:简要介绍了离子液体双水相体系的功能和特点,牛血清白蛋白、药物及金属离子的性质和作用,在离子液体双水相中牛血清白蛋白与药物之间的相互作用的研究方法。第二章:应用荧光光谱和紫外光谱法,研究了离子液体双水相体系中Fe(Ⅲ)对诺氟沙星和牛血清白蛋白的相互作用的影响。研究显示诺氟沙星对牛血清白蛋白有荧光猝灭作用,而且属于静态猝灭过程。经过计算得到在298K和288K下的结合常数分别为3.56×106L mol-1与5.43×105L mol-1,结合位点数分别为1.17(288K)和1.08(298K)。由热力学参数得诺氟沙星和牛血清白蛋白间的作用类型主要为疏水作用力。用同步荧光法探究了诺氟沙星对牛血清白蛋白构象的影响。由F rster非辐射能量转移理论计算得受体和供体之间的结合距离r=2.00nm。Fe(Ⅲ)存在导致了诺氟沙星与牛血清白蛋白相互作用的猝灭常数、结合常数及结合位点数的增大,Fe(Ⅲ)对诺氟沙星与牛血清白蛋白相互作用有协同作用。第三章:利用研究了荧光光谱法研究铜(Ⅱ)对环丙沙星与牛血清白蛋白的相互作用,研究结果表明,环丙沙星对牛血清白蛋白有荧光淬灭作用,其淬灭类型为静态猝灭,通过计算可以得到在300K和310K下的结合常数分别为4.546×104L mol-1与4.740×104L mol-1,结合位点数分别为0.9566(300K)和0.9899(310K)。铜(Ⅱ)存在导致了环丙沙星与牛血清白蛋白相互作用的猝灭常数、结合常数及结合位点数的增大。热力学参数表明环丙沙星和牛血清白蛋白之间的作用力类型主要是疏水作用力。利用同步荧光法探究了环丙沙星对牛血清白蛋白构象的影响,环丙沙星对酪氨酸与色氨酸残基均有猝灭作用,但色氨基残基的荧光光谱特征峰有明显的红移,说明BSA所处微环境的极性增加、疏水性有所降低。由F rster非辐射能量转移理论计算出环丙沙星和牛血清白蛋白之间的结合距离。第四章:左氧氟沙星(LVFX)与牛血清白蛋白的相互作用在离子液体双水相中最佳反应条件下进行,实验结果表明左氧氟沙星对BSA荧光猝灭为静态猝灭过程。锌(Ⅱ)存在导致了左氧氟沙星与BSA相互作用的猝灭常数、结合常数及结合位点数的减小。热力学参数表明LVFX和BSA之间的作用力类型主要是氢键或范德华作用力。利用同步荧光法探究了LVFX对BSA构象的影响。由F rster非辐射能量转移理论计算出LVFX和BSA之间的结合距离。基于左氧氟沙星对BSA荧光的猝灭作用建立了测定左氧氟沙星的新方法,并应用于样品的测定。第五章:结论及展望。
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