【摘 要】
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现如今男女平等的概念深入人心,越来越多的女性兼顾着家庭与工作,随之而来的压力也越来越大,导致由氧化应激引起的生殖系统疾病发病率越来越高。有研究表明,卵母细胞和胚胎质量由于卵巢氧化应激而被降低,早期胚胎的发育能力也被影响。因此,相关的氧化应激模型被建立对该方面的研究是意义重大的。细胞线粒体复合物Ⅱ抑制剂是3-硝基丙酸(3-NPA),细胞线粒体提供ATP的功能可以被3-硝基丙酸抑制,细胞ATP因此而缺
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现如今男女平等的概念深入人心,越来越多的女性兼顾着家庭与工作,随之而来的压力也越来越大,导致由氧化应激引起的生殖系统疾病发病率越来越高。有研究表明,卵母细胞和胚胎质量由于卵巢氧化应激而被降低,早期胚胎的发育能力也被影响。因此,相关的氧化应激模型被建立对该方面的研究是意义重大的。细胞线粒体复合物Ⅱ抑制剂是3-硝基丙酸(3-NPA),细胞线粒体提供ATP的功能可以被3-硝基丙酸抑制,细胞ATP因此而缺乏,3-硝基丙酸还可以诱导线粒体产生和释放ROS,因此细胞氧化应激被诱导而发生。本试验是通过给小鼠腹腔注射3-硝基丙酸(3-NPA),从而建立小鼠卵巢氧化应激模型。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为含155个氨基酸的促有丝分裂的阳离子多肽,对于组织细胞具有修复的作用,促进组织细胞的增殖分化。bFGF还具有一定的对抗氧化应激的作用和抑制凋亡的作用。本试验旨在研究,将碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)添加到体外培养液中会对3-硝基丙酸诱导的小鼠早期胚胎体外发育产生怎样的影响。试验分为阴性对照组(KSOM),阳性对照组(KSOM+bFGF),3-NPA处理组(体内注射3-NPA+KSOM),抗氧化剂处理组(KSOM+3-NPA体内注射+bFGF),对这四个试验组小鼠囊胚期的胚胎内活性氧含量,谷胱甘肽水平以及线粒体膜电位进行了检测及分析,然后对各试验组囊胚期胚胎内的抗氧化相关基因SOD1,SOD2,GPX3,GPX4,CAT,Nrf,还有与细胞全能性有关基因SOX2,CDX2,H19及细胞凋亡有关基因Bax,Cyt-c,Caspase-9的mRNA表达水平进行了检测。试验结果表明,浓度为100 ng/m L的bFGF处理组与对照组及其他浓度处理组相比,使4-细胞率(P﹤0.05)及囊胚率(P﹤0.05)显著提高了。同时bFGF显著降低了囊胚期胚胎内的活性氧含量(P﹤0.05),并显著提高了囊胚期胚胎内的谷胱甘肽水平和线粒体膜电位水平(P﹤0.05)。在小鼠早期胚胎体外培养液中添加bFGF后,囊胚期胚胎内与抗氧化水平相关基因GPX3、GPX4、NRF2、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平被上调。此外,bFGF的添加还提高了囊胚期胚胎内细胞全能性相关基因SOX2、CDX2、H19的mRNA表达水平。最后发现,囊胚期胚胎内细胞凋亡相关基因Bax、Cyt-c、Caspase-9的mRNA表达水平因bFGF的添加而被降低了。综合以上结果说明,bFGF通过降低3-硝基丙酸诱导的小鼠早期胚胎氧化应激水平和改善线粒体膜电位水平,从而提高了3-硝基丙酸诱导的小鼠早期胚胎的抗氧化水平和降低了细胞凋亡水平,进而有效保护了3-硝基丙酸诱导小鼠的早期胚胎体外发育,改善了3-硝基丙酸诱导的小鼠早期胚胎质量。
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