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研究背景：当今水体富营养化污染以及由此造成的蓝藻爆发已成为人类面临的首要环境问题。大量蓝藻在水体中生长时产生的许多有毒物质微囊藻毒素对水环境产生了严重影响并其对多种生物包括人类都具有威胁。因此,微囊藻毒素的毒性作用机理已然成为研究热点。微囊藻毒素LR是其中研究较为广泛,毒性较大的微囊藻毒素。目前认为,微囊藻毒素LR的主要致毒机理是通过抑制蛋白磷酸酶2A的活性从而产生一系列的细胞毒性作用。研究发现蛋白磷酸酶2A的活性对于肿瘤细胞的生长、增殖、粘附、迁移等都具有重要的作用。实验室的前期研究主要着眼于MCLR在多种正常细胞系中的致毒效应并获得了大量信息,也选择了一种肿瘤细胞进行了初步研究,为进一步探究MCLR对肿瘤细胞的作用,本实验选取了人喉癌上皮细胞Hep-2作为研究对象。研究方法：应用流式细胞仪、免疫印迹技术、免疫荧光技术、免疫共沉淀技术以及细胞增殖实验、细胞划痕实验和Transwell肿瘤细胞迁移实验来研究不同浓度的MCLR (0.5μM、1μM、5μM和10μm)处理Hep-2细胞24小时后,产生各种细胞效应以及对PP2A活性的影响方式和相关分子变化。研究结果：在本实验的浓度和时间条件作用下,MCLR能够进入到Hep-2细胞内,与PP2A/C亚基共价结合抑制PP2A活性；MCLR能够影响PP2A各亚基蛋白水平,如下调PP2A/A蛋白表达,上调PP2A/C蛋白表达,略微下调PP2A/B55α亚基蛋白表达,但对PP2A/B56α亚基蛋白表达影响不明显；MCLR还会影响PP2A/C的翻译后修饰水平,上调PP2A/C亚基Tyr307位点磷酸化水平和Leu309位点的甲基化水平；MCLR能够导致Hep-2细胞内a4和PP2A/C亚基解离并影响AC核心酶稳定性；MCLR还能造成细胞骨架的重构以及骨架相关蛋白Tau、Ezrin和VASP磷酸化水平的上升；MCLR能够引起P38和ERK1/2通路的激活；MCLR能够促进Hep-2细胞迁移,但是对其细胞周期、细胞凋亡和细胞增殖影响不明显。研究结论：MCLR能够进入Hep-2细胞并抑制PP2A活性,其作用方式是与PP2A/C亚基共价结合、改变PP2A各亚基蛋白水平及PP2A/C亚基翻译后修饰水平、改变a4与PP2A/C亚基、AC核心酶的结合等。MCLR引起Hep-2细胞骨架重构与PP2A影响骨架相关蛋白磷酸化有关.MCLR促进Hep-2细胞迁移,提示MCLR具有促进肿瘤侵袭的作用。