【摘 要】
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传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus,IHHNV)也称为细角滨对虾浓核病毒(Penaeus stylirostris densovirus,Pst DNV),是已知对虾病毒中最小的病毒。IHHNV危害性大,感染性强,宿主比较广泛,可感染南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(P
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传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus,IHHNV)也称为细角滨对虾浓核病毒(Penaeus stylirostris densovirus,Pst DNV),是已知对虾病毒中最小的病毒。IHHNV危害性大,感染性强,宿主比较广泛,可感染南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(Penaeus monodon)、细角滨对虾(Penaeus stylirostris)等,给对虾养殖产业造成了巨大经济损失,是世界动物卫生组织(The World Organization for Animal Health,OIE)规定的须向其申报的甲壳动物重要病原。IHHNV于1981年首次发现于美国太平洋地区,2001年在我国首次报道,目前已经在全国范围内流行开来,是严重危害我国对虾养殖业的主要病毒之一。有相关研究报道,IHHNV对宿主的致病性与宿主的发育阶段密切相关。在细角滨对虾中,幼虾较成虾更容易感染IHHNV。南美白对虾是我国对虾养殖产业最主要的养殖品种,其养殖数量多、规模大,经济价值高。因此,研究IHHNV对不同发育阶段南美白对虾的感染差异,探索南美白对虾对IHHNV的敏感阶段,具有较好的科研价值,可为南美白对虾的病害防控提供理论依据。本文调查了不同发育阶段南美白对虾自然感染IHHNV的规律,并通过室内投喂攻毒,运用普通PCR、实时荧光定量PCR等技术,比较了IHHNV对不同发育阶段南美白对虾的感染差异,以及IHHNV在稚虾和成虾不同组织器官中的感染情况。其主要研究内容及结果如下:1.调查了不同发育阶段南美白对虾自然感染IHHNV的情况。采用普通PCR方法检测了594尾不同发育阶段的南美白对虾样品,200尾样品呈IHHNV阳性,其中南美白对虾仔虾IHHNV感染率为11.9%,稚虾IHHNV感染率为50%,成虾IHHNV感染率为37.9%。将自然感染IHHNV的南美白对虾进行实时荧光定量PCR检测,结果显示南美白对虾仔虾和稚虾病毒载量高于成虾。不同发育阶段南美白对虾IHHNV感染率及病毒载量表明,南美白对虾稚虾自然感染IHHNV较严重。2.通过投喂攻毒的方式研究了不同发育阶段南美白对虾人工感染IHHNV的情况。经普通PCR检测,攻毒组30尾南美白对虾仔虾样品有13尾呈IHHNV阳性,IHHNV感染率为43.3%;攻毒组15尾南美白对虾稚虾样品有12尾呈IHHNV阳性,IHHNV感染率为86.7%;攻毒组15尾南美白对虾成虾样品有7尾呈IHHNV阳性,IHHNV感染率为46.7%。对不同发育阶段南美白对虾IHHNV阳性样品进行实时荧光定量PCR检测,南美白对虾仔虾IHHNV载量最高为28.7 copies/μl DNA,稚虾最高为28.2 copies/μl DNA,成虾最高为18 copies/μl DNA。实验结果表明,不同发育阶段的南美白对虾都可以通过摄食途径感染IHHNV,仔虾和稚虾的病毒载量高于成虾。组织病理学观察表明,IHHNV阳性南美白对虾稚虾和成虾鳃细胞出现细胞核肿大。3.研究了南美白对虾稚虾和成虾不同组织器官(肝胰脏、鳃、肌肉、游泳足、眼)感染IHHNV的情况。经投喂攻毒,15尾南美白对虾稚虾不同组织器官IHHNV感染率分别为肝胰脏100%、鳃86.7%、肌肉33.3%、游泳足86.7%、眼无感染;15尾南美白对虾成虾不同组织器官IHHNV感染率分别为肝胰脏86.6%、鳃46.7%、肌肉13.3%、游泳足13.3%、眼无感染。南美白对虾稚虾和成虾肝胰脏IHHNV感染率最高。采用实时荧光定量PCR方法检测了南美白对虾稚虾和成虾IHHNV阳性的组织器官,结果表明,南美白对虾稚虾和成虾肝胰脏的IHHNV载量最高,为IHHNV的敏感器官。
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