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目的：研究去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人胰腺癌细胞系MiaPaca2的生长及Runt相关转录因子3(runt-related transcription factor3, RUNX3)基因甲基化和表达的影响,探讨RUNX3基因在胰腺癌细胞中失活的主要机制,进一步探索通过改变胰腺癌细胞RUNX3基因甲基化来治疗胰腺癌的新思路。方法：(1)体外传代培养MiaPaca2胰腺癌细胞,经不同浓度5-Aza-CdR (2.5μmol/L×5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)处理24h-96h后,倒置显微镜下观察MiaPaca2细胞形态学变化；MTT法检测5-Aza-CdR对MiaPaca2细胞生长增殖的影响。(2)收集未经药物处理和经10μmol/L5-Aza-CdR处理72h的MiaPaca2细胞,提取两组细胞基因组DNA,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测RUNX3基因甲基化的变化情况。(3)收集未经药物处理和经5μmol/L及10μmol/L5-Aza-CdR处理72h的MiaPaca2细胞,提取各组细胞总RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测RUNX3mRNA表达的变化。结果：(1)经5-Aza-CdR处理后,MiaPaca2细胞的生长受到抑制,且随着药物浓度的增加及作用时间的延长其抑制作用越明显。(2)未经药物处理的MiaPaca2细胞RUNX3基因呈完全甲基化状态,而经10μmol/L5-Aza-CdR处理72h后,RUNX3基因表现为不完全甲基化状态,该基因甲基化得到部分逆转。(3)未经药物处理的MiaPaca2细胞未能检测到RUNX3基因mRNA表达,而经5μmol/L及10μmol/L5-Aza-CdR处理72h后,RUNX3mRNA可恢复表达,且表达水平与用药剂量存在一定量效关系。结论：RUNX3基因甲基化状态与胰腺癌的发生发展有密切关系,异常甲基化可能是引起RUNX3基因表达缺失的主要机制。RUNX3基因在胰腺癌MiaPaca2细胞中为完全甲基化状态,RUNX3mRNA表达缺失,5-Aza-CdR可以逆转胰腺癌MiaPaca2细胞RUNX3基因的甲基化状态,重新激活其表达,从而发挥其抑制肿瘤细胞生长和诱导凋亡的作用。RUNX3基因可能成为胰腺癌的一个新的生物学标志和基因治疗的靶点,运用去甲基化药物改变胰腺癌细胞RUNX3基因的甲基化可为胰腺癌的生物学治疗提供一种新的思路。