角质细胞生长因子-2对烟雾吸入所致肺损伤修复作用的实验研究

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目的观察角质细胞生长因子-2对烟雾吸入所致肺损伤的修复作用,并研究其相关机制。方法新西兰大白兔120只制成烟雾吸入性损伤模型,随机平均分为五组:0mg/kg组:致伤兔不作处理;PBS组:致伤后4小时,雾化吸入磷酸缓冲盐溶液(PBS)5ml,每日1次,连续7日;1mg/kg组:致伤后4小时,雾化吸入KGF-2(1mg/Kg,溶于5ml PBS),每日1次,连续7日;2mg/kg组:致伤后4小时,雾化吸入KGF-2(2mg/K g,溶于5ml PBS),每日1次,连续7日;5mg/kg组:致伤后4小时,雾化吸入KGF-2(5mg/K g,溶于5ml PBS),每日1次,连续7日;每组动物分别于治疗1d、3d、5d、7d后,在各时相点行动脉血气分析,放血处死,收集标本,Western blot法测定肺组织中肺表面活性蛋白A(SP-A)、血管内皮生长因子(VEGF)及Bcl-2蛋白水平,Real time PCR检测肺组织中肺表面活性蛋白A、血管内皮生长因子及Bcl-2蛋白mRNA水平,TUNEL检测细胞凋亡情况,并观察肺组织病理改变。结果(1)与0mg/kg组比较,PBS组烟雾吸入性损伤兔的PaO2、PaCO2均无显著差异(P>0.05);致伤后,生存时间对PaO2、PaCO2均有影响(P<0.01),随着生存时间延长,PaO2、PaCO2总体变化具有上升趋势;雾化吸入KGF-2对烟雾吸入性损伤兔PaCO2无明显影响(P>0.05),对PaO2有影响(P<0.01),能够提高PaO2,以5mg/kg组与各组比较差异均显著(P<0.05),且KGF-2与时间有交互作用(P<0.05),5mg/kg组,在第7d提高氧分压最明显。(2)与0mg/kg组比较,PBS组动物肺组织中SP-A、VEGF、Bcl-2含量及相关mRNA表达均无显著差异(P>0.05);致伤后,生存时间对SP-A、VEGF、Bcl-2含量及相关mRNA表达均有影响(P<0.01),随着生存时间延长,SP-A、VEGF、Bcl-2含量及相关mRNA表达总体变化均具有增加趋势;雾化吸入KGF-2对致伤动物肺组织中SP-A、VEGF、Bcl-2含量及相关mRNA表达均有影响(P<0.01),能够提高肺组织中SP-A、VEGF、Bcl-2含量及相关mRNA表达,以5mg/kg组与各组比较差异均显著(P<0.05),且KGF-2与时间有交互作用(P<0.01),5mg/kg组,在第7d提高肺组织中SP-A、VEGF、Bcl-2含量及相关mRNA表达最明显。(3)与0mg/kg组比较,PBS组动物肺组织细胞凋亡指数无显著差异(P>0.05);致伤后,生存时间对肺组织细胞凋亡指数有影响(P<0.01),随着生存时间延长,肺组织细胞凋亡指数总体变化具有降低趋势;雾化吸入KGF-2对动物肺组织细胞凋亡指数有影响(P<0.01),能够降低肺组织细胞凋亡指数,以5mg/kg组与各组比较差异均显著(P<0.05),且KGF-2与时间有交互作用(P<0.01),5mg/kg组,在第7d降低肺组织细胞凋亡指数最明显。(4)肺组织病理检查显示,与伤后第1天相比,各组动物第7天肺部损伤表现均较前减轻,各组相比,以5mg/Kg组动物损伤减轻最为明显。结论KGF-2对烟雾吸入所致肺损伤具有修复作用。其修复作用可能与KGF-2增加烟雾吸入性损伤的肺表面活性蛋白A合成,促进肺新生血管形成,以及抑制肺损伤细胞凋亡这三方面机制有关。
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