水蜜桃是我国重要的水果之一,但由于在采摘、运输和贮藏等环节的技术不成熟及病原菌的侵染,导致水蜜桃采后损失严重。大量报道证实拮抗酵母可以安全有效的抑制果蔬采后病害。本课题筛选出一株有效抑制水蜜桃炭疽病的拮抗酵母菌,探究其主要生防机制,并将其制成冻干粉应用在水蜜桃贮藏保鲜阶段。本论文的主要研究内容有:(1)从在桃园分离到的53株酵母菌株中,通过体外筛选和体内筛选得到可以有效抑制水蜜桃炭疽病病原菌胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)的一株酵母菌Y23;通过对其进行分子特征等鉴定,鉴定其为柠檬形克勒克酵母(K.apiculata)。(2)通过水蜜桃体内实验得出,K.apiculata Y23抑制C.gloeosporioides的最佳浓度为1×10~8 cells/m L;在液体培养基和病原菌孢子共培养后,发现K.apiculata Y23可以显著抑制C.gloeosporioides孢子萌发;同时发现K.apiculata Y23可能对C.gloeosporioides菌丝具有重寄生作用,从而抑制病原菌生长;通过对峙培养实验发现,K.apiculata Y23可以分泌抑菌物质抑制C.gloeosporioides菌丝生长,并可以抑制C.gloeosporioides产孢的数量和质量;通过倒扣培养实验发现,K.apiculata Y23可以产生挥发性抑菌物质抑制C.gloeosporioides生长,并通过GC-MS方法对抑菌物质进行了确定,主要有苯乙醇、乙酸异戊酯、丙酸乙酯、异戊醇和乙酸苯乙酯;水蜜桃经K.apiculata Y23处理后相关抗性酶活性及总酚和类黄酮含量均有所提高,说明提高宿主防卫反应也是其抑菌机理之一。(3)通过K.apiculata Y23与纤维素酶共培养,推测K.apiculata Y23可以分泌蛋白酶降解纤维素酶,作为氮源生长繁殖,通过抑制纤维素酶活性减缓病原菌对宿主细胞壁的破坏,进而延长果实保鲜时间及贮藏期。由此说明K.apiculata Y23降解病原菌胞外酶可能是其一种新的抑菌机理。(4)对K.apiculata Y23活性冻干粉制备过程的离心参数进行了优化,最佳离心参数为离心转速8000 rpm/min,离心时间20 min;并对K.apiculata Y23活性冻干粉的保护剂进行了筛选,发现蔗糖、菊粉和谷氨酸钠这三种保护剂的冻干效果最好;然后对三种效果最好的保护剂进行复配,发现10%菊粉+5%蔗糖+7.5%谷氨酸钠的组合效果最好,K.apiculata Y23存活率可达85.32%;最后在K.apiculata Y23活性冻干粉保存实验中得出-20℃更适宜其保存,在6个月时存活率仍有50.06%。(5)对K.apiculata Y23活性冻干粉剂分别采用浸泡法和喷洒法处理水蜜桃果实,研究这两种应用方法在水蜜桃果实贮藏保鲜方面的影响,无菌水为对照,结果显示:两种处理方法对水蜜桃果实贮藏期间的病害腐烂情况有明显的抑制作用,在贮藏7 d时,腐烂指数分别仅为3.42%和5.61%;而且,两种生防菌剂在水蜜桃果实贮藏期间的失重率、硬度、可溶性固形物含量、果皮细胞膜透性、维生素C含量、总酸含量等方面均起到一定的积极保护作用。表明这K.apiculata Y23的这两种处理方法对水蜜桃果实采后贮藏保鲜方面存在积极的影响,值得进一步研究并进行推广。