细胞外基质(extracellular matrix ECM)过度聚集是肾间质纤维化的病理基础。在肾间质纤维化进程中，肾小管上皮细胞向肌成纤维母细胞转分化及细胞外基质合成增加起着至关重要的作用。众多的研究证明转化生长因子-β(TGF—β)是最强的致纤维化生长因子，与多种纤维化相关疾病的发病密切相关。TGF—β的生物学效应主要通过细胞内Smad信号蛋白介导，其中受体调节Smad(Smad2，Smad3)发挥正性调节作用，抑制性Smad(Smad7)发挥负性调节作用。前期的研究表明采用基因转染技术上调Smad7表达，可有效抑制高糖和糖基化终产物诱导的肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质合成。因此， TGF—β／Smad信号通路可作为防治肾间质纤维化的潜在靶位。 TIEG(TGF—β诱导早期基因)蛋白属于SP1样蛋白家族的新成员，是TGF—β诱导的早期转录因子蛋白，参与调节TGF—β靶基因的表达。TIEG的这种效应主要源于对Smad信号蛋白的调节作用：一方面TIEG能够与Smad7启动子中的GC序列相结合，抑制负反馈调节因子Smad7表达；另一方面通过促进受体调节性Smad2的表达。TIEG增强TGF—β／Smad信号通路正性调节作用，和减弱负性调节作用的双重作用，对TGF—β／Smad信号通路活化发挥着显著的增强效应。因此，通过下调TIEG表达抑制TGF—β／Smads信号通路活化，可望抑制或阻断糖尿病肾病肾间质纤维化进程，改善糖尿病肾病的预后。本课题拟通过RNA干扰技术沉默TIEG基因，为后期构建TIEG基因沉默糖尿病肾病大鼠模型奠定基础。实验共分三部分进行：1、高效TIEG基因沉默siRNA慢病毒载体的构建和筛选；2、含TIEGsiRNA基因慢病毒载体的包装和病毒液的生产；3、TIEGsiRNA基因转染大鼠TIEG基因沉默效率的鉴定。