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前言 胰腺是具有双重分泌功能的特殊器官，具有低血流、易损伤的特点，要求保存条件较高，进一步针对胰腺自身特点，改进保存液，对提高移植胰腺存活率是十分必要的。目前胰腺保存仍存在由保存损伤引起的器官遗弃、移植胰腺功能恢复不良现象，并增加了手术并发症，降低了胰腺移植的生存率。这些都迫使我们在胰腺灌注和保存条件、能量代谢底物提供、保存液性质、保存损伤机制及防治措施等方面作进一步研究，以力求获得突破。 供体器官的短缺严重影响了器官移植的发展。在临床移植实际工作中经常要面临热缺血时间较长器官供体是否可以应用的问题。另外是否可以在术前通过检测手段来判定移植后器官功能恢复情况，这对医生及病人来说都是至关重要的。我们通过对热缺血时间较长的胰腺经保存后进行节段自体移植，了解移植后移植物生存率，并检测保存后胰腺组织中腺苷三磷酸（ATP）和腺苷核苷酸（TAN）水平，探讨其与移植预后的关系。 在缺血再灌注损伤中，由于一氧化氮（NO）具有调节血管张力、抑制血小板和白细胞粘附、改善移植物微循环等作用，因此，通过增强NO-cGMP依赖机制以增加NO不失为设计新型器官保存液提供了一种新的策略。人们已经认识到了NO的双刃剑作用在缺血再灌注损伤中的作用，一方面可通过与氧自由基相互作用激活磷脂酶A2（PLA2）产生脂质过氧化样作用。另一方面作为强烈的血管舒张因子，可使腺泡血管直径增大，并阻止血小板粘附、聚集及白细胞的粘附。有实验证明NO合成的前体物质L-精氨酸（L-Arg）可有效保护胰腺，减轻胰腺水肿，减少腺泡出血坏死，改善循环。NO是由多种组织和细胞产生的免疫调节分子，以L-Arg为底物，在NO合成酶（NOS）催化下产生的。近年研究表明，移植器官缺血再灌注后中性粒细胞向缺血再灌注组织的浸润与器官再灌注损伤有关。我们Euro Collin（EC）液中分别添加L-Arg、N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）和生理盐水（Saline），分别对犬离体胰腺节段进行低温灌注保存，应用犬胰节段移植模型，研究是否可以增加移植胰腺组织NO含量，是否可以减轻胰腺再灌注损伤。 随着器官移植工作的广泛开展，器官保存的质量越来越受到重视，而保存中缺血再灌注损伤是影响器官移植质量的重要因素，因其机理十分复杂，现在尚未完全清楚，目前得到公认的是氧自由基毒性学说和钙离子超负荷学说。针对上述发病机制，为减轻缺血再灌注损伤，国内外学者都进行了大量研究，目前大多采用抗氧化剂治疗，但由于其机制多为生物制剂或化学制剂，存在不同程度的免疫反应或毒性作用。我国学者经过长期研究，从中药中筛选高效低毒的药物保护缺血再灌注损伤，己经取得可喜成绩，其中黄茂有较强的这种保护作用。但上述实验多是对心肌缺血再灌注损伤的研究，而在胰腺缺血再灌注损伤的研究较少，而且所作实验对中药某一单体或对某一中药单一机制研究较多，而对复方的研究或多种机制的综合性研究较少。其药效成分的提取程序复杂，成本高昂，浪费较大，不利实际应用，用药方法多是通过体内注射。本实验所用的中药制剂制作方法简单，容易获取，成本较低，便于实际应用，用药方法是直接使用于离体胰腺灌注、保存液中。在现有的器官保存液中添加适量中药成分已成为我国医学移植领域中的一种特色和优势。国内近年来研究发现许多种中药对器官保存中组织缺血再灌注损伤有较好的保护作用。本实验研究黄民提取液对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响。 实验方 法 健康成年杂种犬，雌雄兼用，体重门一15Kg。建立犬胰腺节段自体移植模型 实验的第一部分 将实验随机分为六组＊，正常对照组：n＝3，行麻醉后开腹，显露胰腺，取病理组织，并取脾静脉血行血胰岛素浓度检测。2．末热缺血组：n二5，切除带有脾动脉、脾静脉的左叶胰腺，UW液保存24h后行自体移植。3．30min组：n＝6，将节段胰腺热缺血 30 min，然后行自体移植。4．60ndn组：n二 6，移植物热缺血时间为 60 min。5．90min组：n＝6，移植物热缺血时间为 90 min。6．120min组：n ＝＝ 4，移植物热缺血时间为 120 dn。进行内分泌功能检测：术后第一周每日测定血糖一次，术后一周作静脉葡萄糖耐量试验JVG’IT太移植后一小时，取脾静脉血和外周血检测胰岛素水平。外分泌 ·2·功能检测：移植后一周胰液分泌量，移植后24h胰液淀粉酶测定。用高压液相方法（HPLC）检测移植胰腺组织ATP／DP人MP。比较各组移植物生存率。测量胰腺组织总含水量（’ITW人并进行病理检查，移植后lh检查结果并进行组织评分。 实验的第二部分 将实验动物随机分为 4组：二．L－Arg处理组：n＝6，胰腺切取后迅速用加有L－Ars闷00m牙ks）的EC液经脾动脉灌注、保存。2．L－NAME处理组：n＝6，用加有 L－NAME门)的 EC液灌注、保存。3．移植对照组：n＝6，用加有等体积的生理盐水的 EC液灌注、保存。4．正常对照组，n＝4，行麻醉后开腹，显露胰腺，取病理