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Fyn基因是非受体型酪氨酸蛋白激酶Src家族成员之一,在细胞的生长、生存、凋亡、细胞与细胞之间的粘附以及免疫应答作用方面起到十分重要的作用。七鳃鳗是具有很高研究价值的模式生物,因为它是在进化上连接脊椎动物和无脊椎动物的最原始的无颌类脊椎动物。同时,它不仅有固有免疫系统,还具有适应性免疫系统。在目前的研究中,对七鳃鳗的免疫系统的研究一直是当今的热点。本研究在七鳃鳗中首次发现了Fyn-like基因,并对Fyn-like基因的cDNA进行了克隆。Fyn-like的ORF区全长1611bp,编码537个氨基酸,3’UTR区1424bp。通过blast序列比对分析发现,它与SRC家族的成员(Yes、Src和Fyn)的同源性都很高。为了说明Fyn-like基因的进化关系,从基因数据库中找出从无颌类到哺乳类动物的Fyn、Yes和Src基因序列进行系谱分析,进一步证实了所克隆得到的基因序列为Fyn-like。目前为止,发现Fyn-like基因从无颌类中首次被发现。对其保守性进行分析,结果表明Fyn-like基因同样包含了三个保守结构域,分别为Src同源结构域3(SH3)、Src同源结构域2(SH2)和激酶结构域(PKc)。通过实时定量PCR和免疫印迹实验分别从基因水平和蛋白水平来检测Fyn-like在七鳃鳗各个组织(白细胞、脂肪体、鳃、肾、心)中的表达,结果发现,用混合菌刺激后,发现在腮组织和白细胞中表达量明显上调,这个结果说明,酪氨酸蛋白激酶Fyn很可能参与免疫应答。免疫荧光实验发现,Fyn-like蛋白主要分布在细胞质中,这可能还与它参与体内多条信号通路、调节细胞的生物学功能相关。我们也分时段检测了鳃组织中免疫后的Fyn-like蛋白的表达情况,结果发现在加强免疫后的16h时,Fyn-like蛋白的表达量最高,随后会逐渐减少。同时,此次研究也可以为之后研究SRC家族激酶之间的进化关系提供必要的基础。