苹果蠹蛾胚胎细胞系的建立及其生物学特性

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzduoying001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
昆虫细胞离体培养技术是现代生物学科研究中一种重要的研究手段,被广泛应用于生物学、医学及农业等多个领域。建立苹果蠹蛾胚胎细胞系,并研究其生物学特性,为苹果蠹蛾生理学研究提供离体材料和工具。  本研究以苹果蠹蛾卵为材料,成功建立了八株胚胎细胞系,分别命名为Cp-E-4、Cp-E-5、Cp-E-6、Cp-E-9、Cp-E-10、Cp-E-11、Cp-E-12和Cp-E-13。八株细胞系在含有10%FBS的TNM-FH培养基中均已传至60代以上,其中代数最高的Cp-E-11已传至96代,代数最低的Cp-E-4已传至67代。八株细胞系长期冻存于液氮环境中,并多次复苏成功。细胞形态显微观察发现,其中胚胎细胞系Cp-E-5的细胞形态主要以圆形和长梭形为主,分别占43.68%和56.32%;而其他七株细胞系主要以圆形细胞为主。对苹果蠹蛾胚胎细胞系Cp-E-9和Cp-E-13进行单细胞克隆,最后得到27株克隆株。  染色体核型分析表明,苹果蠹蛾胚胎细胞系的染色体多数呈颗粒状,少数呈短棒状存在,染色体数目众多且不等,分布在13~300之间,呈多倍化和异倍化的现象,具有典型的鳞翅目昆虫染色体特征。  线粒体COΙ基因序列与NCBI数据库中苹果蠹蛾COΙ基因序列比对相似性达99%,表明八株细胞系均来源于苹果蠹蛾。苹果蠹蛾的COΙ基因与暗黑鳃金龟的COI基因序列一致性为81.5%,与甜菜夜蛾的COI基因序列一致性为88.0%,与粉纹夜蛾的COI基因核苷酸一致性为85.6%。苹果蠹蛾的COΙ基因的Hinf I酶切谱带与暗黑鳃金龟细胞系Hp-E-1、甜菜夜蛾细胞系Se-1和粉纹夜蛾细胞系Tn9-4s的Hinf I酶切谱带具有明显不同。建立了PCR-RFLP一种简易的苹果蠹蛾细胞系的鉴定方法。  选取其中四株细胞系对其进行生长曲线测定,Cp-E-9、Cp-E-10、Cp-E-11和Cp-E-13在28℃、120h的群体倍增时间分别为41.54 h、40.98 h、43.08 h和40.00 h。  检测苹果蠹蛾胚胎细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒和苹果蠹蛾颗粒体病毒的敏感性,结果表明细胞系Cp-E-9、Cp-E-11和Cp-E-13对这两种病毒都不敏感。  本研究通过建立苹果蠹蛾胚胎细胞系,并对细胞系的形态特征、染色体特征、生长动力学及对病毒的敏感性等方面进行了研究,为苹果蠹蛾的生理学研究奠定了理论基础。
其他文献
目的:本次对品管圈应用S B A R沟通模式对护士床旁交接班缺陷率的影响进行探讨.方法:选取2014年6月—2015年6月我院感染科床旁交接652例中共有379例缺陷例数(该阶段为未实施
目的:介绍细节护理模式在眼科手术中的操作方法及应用价值.方法:以虹膜夹持型前房人工晶体植入矫正高度近视手术为例,选取我院2014年12月—2017年12月高度或超高度近视的眼科
目的:探讨人文护理联合整体护理在内分系统疾病护理中应用效果.方法:收集我院2016年2月—2018年2月收治的内分系统疾病患者200例,按照患者入院时间的先后顺序分为对照组(n=10
近年来流行性感冒严重危害到了儿童健康,本文从改善护患沟通、指导用药配合以及流感预防宣教三大块临床工作所需注意的护理事宜进行阐述,谨希望有助于改善目前临床护理工作的
葱蝇Delia antiqua(Meigen),隶属双翅目Diptera花蝇科Anthomyiidae地种蝇属Delia,其幼虫以群居形式危害百合科植物,是一种世界性分布的重要地下害虫。受寄主植物种类、营养条件
目的:分析品管圈在脑卒中康复护理健康教育中的作用.方法:选取我科于2017年3月—2018年3月收治60例脑卒中患者作为研究对象,均予以健康教育,对比品管圈活动施行前后患者对护
目的:探讨航空公司乘务员因抑郁症停飞的因素.方法:研究时间为2013年2月—2018年2月,从国内某航空公司停飞数据库中调取的因抑郁症停飞乘务员55例作为研究对象,调查乘务员的
目的:研究与分析对精神分裂症的患者和家属进行心理教育的影响.方法:选取在2017年1月—2017年10月时间内来我院进行治疗的精神分裂症的92例患者,随后采取统计学科学分组法将