医用水蛭及水蛭素对随意皮瓣淤血改善的临床及实验研究

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背景:皮瓣移植是整形修复重建外科临床常用的治疗手段。皮瓣移植术后并发症之一是血液淤滞所致的皮瓣淤血坏死,虽不常见但可影响疗效。如何改善微循环,促进皮瓣愈合,提高皮瓣移植的成功率一直是整形修复重建外科领域研究的热点及难点。临床实践已证明活体水蛭吸血疗法救治皮瓣静脉淤血具有作用直接、简单方便的鲜明特点,是治疗皮瓣淤血行之有效的方法。在整形修复重建外科、美容外科及相关学科中具有推广应用价值。但活体水蛭生活在温暖潮湿的水田,冬眠期较长,其生物特性决定了吸血疗法应用常会受到地域、气候等客观条件的限制,在医学伦理上无明确定论,目前无法在临床广为普及应用。为进一步开发医用水蛭的临床应用,需要针对其有效成分开展研究,期待通过天然水蛭素局部注射来代替水蛭吸血疗法解决随意皮瓣移植后的淤血问题,以提高手术成功率。本研究分以下三个部分:第一部分活体医用水蛭在救治随意皮瓣淤血并发症中的临床应用目的:总结并探讨应用活体水蛭吸血疗法救治皮瓣静脉淤血的临床疗效。方法:对进行性加重的皮瓣静脉淤血,采用活体水蛭置于皮瓣表面吸吮血液,待皮瓣血运明显改善后结束治疗。结果:1995年1月至2008年12月,临床应用8例,除1例皮瓣远端边缘部分出现小面积坏死外,其余7例均取得良好的治疗效果。结论:活体水蛭吸血疗法是一种简单、直接、较为廉价的救治皮瓣静脉淤血的方法。局部应用天然水蛭素改善猪淤血皮瓣微循环的实验研究(物理指标、SOD、MDA、MPO)目的:探讨局部应用天然水蛭素对猪随意型淤血皮瓣组织中几项生化指标表达的影响。方法以广西巴马小型猪为实验对象,建立随意皮瓣淤血的动物模型,皮瓣随机分成三组,A组(局部注射生理盐水,作为对照组)、B组(局部注射天然水蛭素,20ATU/皮瓣)和C组(局部注射天然水蛭素,40ATU/皮瓣)。进行髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)的测定。结果:用药组(B组和C组)的MDA、MPO、SOD与对照组同期比较差异有显著意义( P<0.05)。以上指标在B组和C组组间差异无统计学意义( P>0.05)。术后12天观察,B组、C组皮瓣存活率高于A组(P<0.05),不能认为B组皮瓣存活率高于C组(P>0.05)。结论:天然水蛭素通过抑制氧自由基损伤反应来改善淤血皮瓣的微循环,提高皮瓣成活长度。天然、重组水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型VEGF、TXB2的影响目的:探讨天然、重组水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型成活保护机制作用,以及对皮瓣血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血栓素B2(TXB2)的影响。方法:以Wistar大鼠30只为实验对象,建立随意皮瓣淤血的动物模型,皮瓣随机分成三组,A组(局部注射天然水蛭素,5u/皮瓣);B组(局部注射重组水蛭素,5u/皮瓣);C组(对照组,局部注射生理盐水)。测定VEGF、TXB2含量,计数皮瓣新生血管密度。荧光RT-PCR测定VEGFmRNA表达量。第7天计算皮瓣成活率。结果:组织学观察术后7天行组织切片染色观察,天然水蛭素组皮瓣表皮完整,无萎缩,轻度角化过度,真皮内及皮下无明显炎症细胞浸润,组织无水肿,真皮下微血管多;重组水蛭素组表皮萎缩不明显,皮下组织轻度水肿,炎症细胞浸润略重,真皮下微血管较多;对照组皮下水肿明显,大量炎症细胞浸润,局部表皮溃疡形成,真皮下仅有少量微血管。VEGF染色阳性血管数目:术后第3、5、7天A组VEGF染色阳性血管数最多,B组次之,C组最少,各组两两比较P<0.05,差异有统计学意义。VEGFmRNA的表达:术后第3、5、7天A组VEGFmRNA的表达最多,B组次之,C组最少。各组两两比较P<0.05,差异有统计学意义。用药组(A组和B组)VEGF比对照组(C组)明显增高。皮瓣组织TXB2含量测量:术后第3、5天,对照组皮瓣组织TXB2含量高于A、B两组皮瓣组织TXB2含量,P<0.05,差异有统计学意义。A组皮瓣组织TXB2含量高于B,P>0.05,差异无统计学意义。皮瓣存活面积:天然水蛭素组(A): 26.64±2.24(cm~2),重组水蛭素组(B):23.64±2.02(cm~2),对照组(C): 20.71±1.41(cm~2);皮瓣存活率(%):天然水蛭素组(A): 88.87±2.24,重组水蛭素组(B): 79.97±2.02,对照组(C): 69.07±1.42.各组之间两两比较,P<0.05,差异有统计学意义。结论:天然、重组水蛭素能够促进随意皮瓣VEGF表达,TXB2降低,有利于新生血管的生成,改善淤血皮瓣的微循环,提高皮瓣成活面积,由此推断天然及重组水蛭素对随意皮瓣移植后静脉淤血可能有改善作用。
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