大豆抗病毒基因GmNH23的功能域分析及其SMV效应蛋白的鉴定

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hy009009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物体内具有化学、物理、生物等多种策略抵抗病原体的入侵,植物防御系统中最重要的一种策略是依赖于由抗性基因(Resistance gene,R)编码的蛋白,其能够特异性识别病原体。大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)在全球大豆生产中是最普遍的病毒。SMV是Potyviridae家族中Potyvirus属的成员,其基因组是单链正义RNA,编码10种蛋白质,分别是P1、HC-Pro、P3、6K1、CI、6K2、NIa-VPg、NIa-Pro、NIb、CP。对不同SMV株系具有抗性的多个独立抗性基因座已被鉴定,其中大多数是非Toll白介素受体-核苷酸结合位点-亮氨酸重复(Non-TIR-NBS-LRR)类型的R基因。  烟草中已经发现了抗TMV的N基因,N基因属于NBS-LRR类的R基因。实验室的前期研究在大豆基因组上发现一个与N基因同源的并对TMV和SMV都具有抗性的基因,将其命名为GmNH23(Glycine max N-Homolog23)。本研究的目的是确定GmNH23编码对SMV具有抗性的功能结构域,将GmNH23蛋白按照结构域预测网站将其分成5个部分,分别为TIR、NB-ARC、DUF、TN(TIR+NB-ARC)、ND(NB-ARC+DUF)。超敏反应(Hypersensitive Response,HR)发现TN结构域对SMV具有抗性。HR实验结果显示TN结构域可能主要与SMV编码的NIa-Vpg和NIa-Pro蛋白相互作用从而发挥抗性作用。同时因为GmNH23基因是N基因的同源基因,所以检测了GmNH23基因编码的结构域对TMV的抗性。实时荧光定量PCR和Northern Blot实验结果表明TN结构域对TMV具有抗性。为了确定tn基因可否在野生型本氏烟草中表达,在tn的N端融合表达HA标签。Western Blot实验结果表明tn基因可以在烟草中表达。通过与TMV共侵染发现在tn的5端融合表达HA标签会影响其对TMV的抗性,所以在tn的C端融合表达HA标签,发现其对tn的抗性不产生影响。通过在tn的5端融合表达不同细胞器的信号肽,利用农杆菌瞬时表达发现当与细胞质信号肽、核输出信号肽序列、以及果胶酶信号肽序列融合表达时tn的抗性完全丧失,初步确定抗性基因tn可能主要在细胞核中发挥抗性作用。以上实验为进一步研究大豆抗病基因的作用机制以及与SMV互作的机理奠定了基础。
其他文献
课题组研发的生态复合墙结构是一种生态环保、安全经济的新型装配式结构体系,是适应我国墙体材料改革新形势的产物。目前课题组已对多层生态复合墙结构进行了深入细致的研究,然
  基于CFD理论,应用流体力学仿真软件Fluent,采用SIMPLE算法和标准κ-ε湍流模型,对新型螺旋道式重型车空气滤清器的内部流场进行三维数值模拟分析,给出了空气滤清器内流场
  在G8300柴油机的基础上,通过增加燃气系统,开发出的DF8300柴油/天然气双燃料发动机,总体布置与G8300柴油机相同;采用双燃料自动转换技术、气体燃料大流量喷射技术、废气涡轮
喷油泵传动轴是柴油机的重要零件之一,其失效是现代中小型高速柴油机的典型事故,故其安全设计显得十分重要.本文就某柴油机喷油泵传动轴的失效案例,先简单介绍了喷油泵的扭矩
杜氏盐藻是一种单细胞真核藻类,无细胞壁,含有大量的甘油、胡萝卜素和蛋白质,是极具经济价值和研究价值的藻类。本文利用低能离子束对盐生杜氏藻进行诱变,选育高产β-胡萝卜
  随着节能减排政策和环保要求的日益严格,天然气作为清洁能源,越来越多地应用到内燃机行业中。济柴动力总厂顺应行业要求,迎合市场变化,自主设计开发出了一款低排放、高效率、
克伦特罗(Clenbuterol,CBL)、沙丁胺醇(Salbutamol,SAL)等β-兴奋剂由于对人体的毒副作用已被各国禁止在畜牧业使用。目前对其分析监控主要采用二步法:ELISA法筛选和GC-MS法确证
单边螺栓端板连接钢管混凝土框架是由方或圆钢管混凝土柱组成,与钢梁通过端板连接形成的一种组合结构,具有抗震性能好、连接方便、承载力高等优势,多次试验证明单边螺栓端板
  介绍了一种多点喷射大功率天然气发动机的启停控制策略,给出了天然气发动机启动和停车控制的基本硬件组成,详细说明了天然气发动机启动和停车功能的实现方法和控制流程。
本研究在一台大功率天然气发动机上,通过热电偶测温法对发动机的动力单元主要部件进行了温度场试验.发动机动力单元零部件的工作环境非常恶劣,为了验证其工作可靠性和使用持