【摘 要】
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micro RNA是一类具有调控作用的非编码的RNA分子,近年来的研究表明mi RNA可以在转录后水平对基因的表达进行调控,异常表达的mi RNA与脑胶质瘤的发生发展密切相关。尽管有些异
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micro RNA是一类具有调控作用的非编码的RNA分子,近年来的研究表明mi RNA可以在转录后水平对基因的表达进行调控,异常表达的mi RNA与脑胶质瘤的发生发展密切相关。尽管有些异常表达的mi RNAs作用机制已被阐释,但关于mi R-370在脑胶质瘤的研究尚无报道。为了探讨mi R-370在脑胶质瘤中的作用,首先应用实时荧光定量PCR技术对mi R-370在脑胶质瘤组织样品和脑胶质瘤细胞系中的表达情况进行分析,结果表明大部分脑胶质瘤组织中mi R-370的表达量均低于正常组织,并且mi R-370在SHG44、U87及U251三种脑胶质瘤细胞中的表达量相对于正常脑组织亦存在不同程度的下降。采用MTT增殖实验发现mi R-370过表达能够抑制脑胶质瘤细胞的增殖,而抑制mi R-370的表达则对脑胶质瘤细胞的增殖具有促进作用。为了进一步探究mi R-370的作用机制,采用PI/Annexin V双染实验利用流式细胞仪分析细胞凋亡情况,发现mi R-370过表达时可以促进脑胶质瘤细胞的凋亡。此外,通过PI染色分析发现,mi R-370对脑胶质瘤细胞周期各时相没有显著性影响。细胞划痕实验实验结果显示,过表达mi R-370时可以抑制脑胶质瘤细胞的迁移能力,而抑制mi R-370表达时能够促进脑胶质瘤细胞的迁移能力。通过生物信息软件分析发现DNMT3A可能是mi R-370的靶基因,应用实时荧光定量PCR和Western blot实验发现,mi R-370可以调控DNMT3A在m RNA水平以及蛋白水平的表达,并且双荧光素酶报告实验结果证实了mi R-370以DNMT3A为靶基因。综上所述,mi R-370可以抑制脑胶质瘤细胞增殖与迁移,同时mi R-370以DNMT3A为靶基因。
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