【摘 要】
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本课题组前期应用cDNA芯片和蛋白双向电泳及质谱分析筛选,发现着丝粒蛋白A (centromere protein A, CENP-A)在HBx突变相关的肝癌细胞中高表达,但在原发性肝细胞癌(hepatocell
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本课题组前期应用cDNA芯片和蛋白双向电泳及质谱分析筛选,发现着丝粒蛋白A (centromere protein A, CENP-A)在HBx突变相关的肝癌细胞中高表达,但在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)发生中的生物学功能及作用机制尚知之甚少。本研究采用RT-PCR、实时定量PCR、PCR-SSCP、蛋白印迹和免疫组化方法,发现CENP-A的转录和蛋白水平在原发性肝细胞癌组织中的表达均较癌旁组织显著增高,并与p53信号通路相关;CENP-A的蛋白表达水平与HCC组织学分级正相关,可作为评价HCC组织学进展的指标;CENP-A的异常表达主要由转录调节引起,基因突变不是主要影响因素;经对肝癌细胞株中CENP-A基因敲减证实,细胞周期表现G1期阻滞,S期细胞比例减少,凋亡细胞比例增加,并致Bcl-2/Bax比值下降;经对肝癌细胞株中CENP-A基因过表达证实,肿瘤细胞生长加快,平板克隆形成率增加。提示CENP-A的表达水平与肝癌细胞增殖状态相关;并初步探讨了CENP-A与p53之间的调控关系,为深入研究CENP-A生物学作用与肝癌发生机制奠定了实验基础。
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