NSMC-Mn肝毒性及其药代动力学的初步研究

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第一部分NSMC-Mn肝毒性的评估目的:1.研究不同浓度在不同时间对肝细胞株(QSG7701)增殖的影响;2.评估NSMC-Mn对大鼠肝功能的影响。方法:1.利用MTT法,观察NSMC-Mn在浓度为12.5、2.5、0.5、0.1、0.02 mmol/L,时间点分别为6h、12h、24h、48h对人体肝细胞株(QSG7701)的存活率及生长曲线的影响。数据均采用origin9.0软件处理。2.尾静脉注射NSMC-Mn(0.2mmol/kg),分别于给药前5天及给药后5天、14天尾静脉采血,离心(10000r/min,6min)取血清,样本用Dx C800全自动生化分析仪进行检测。数据均采用SPSS14.1统计软件处理。结果:1.不同浓度下NSMC-Mn造影剂细胞存活率与生长曲线表明:与空白对照组比较,低浓度下(0.02,0.1,0.5 mmol/L)48 h内NSMC-Mn对细胞存活率无明显影响(p>0.05);浓度高于2.5 mmol/L情况下,24 h和48 h对细胞增殖出现影响(p<0.05)。2.一次性给药后5天、14天,反应肝功能的各项生化指标ALP、GGT、TBA等无显著变化。结论:1.低浓度下,NSMC-Mn对肝细胞株(QSG7701)的增殖没有明显抑制;高浓度下(>药用剂量10倍以上),NSMC-Mn可抑制肝细胞株的增殖。2.一次给药NSMC-Mn后,大鼠各项生化指标无显著变化。第二部分研究NSMC-Mn的药代动力学目的:1.研究NSMC-Mn在大鼠体内的血药动力学;2.研究NSMC-Mn在大鼠体内的排泄动力学。方法:1.SD大鼠尾静脉注射NSMC-Mn(0.1 mmol/kg),分别于给药前及给药后1 min、3 min、5 min、8 min、13 min、20min、30min、50min采集颈动脉血,样品用含1%HNO3配制,用ICP-MS测定其血锰浓度;使用PKSolver 2.0进行上述数据分别采用非房室、单房室、二房室及三房室模型进行药代动力学相关参数计算。2.SD大鼠尾静脉注射NSMC-Mn(0.1mmol/kg),收集注射前及给药后每半小时的胆汁排出量和每小时的尿液排出量;利用ICP-MS测定其锰浓度,数据均采用origin9.0作图软件处理。结果:1.比较四种房室药代动力学模型,NSMC-Mn在大鼠体内的药动学过程符合血管内三房室模型,分布半衰期t1/2α为0.27min,t1/2β为3.55min,消除半衰期t1/2γ为19.5min,清除率CL为0.1267 min·L·kg-1。2.大鼠尾静脉注射NSMC-Mn(0.1mmol/kg)后,在600min内肝肾排泄了造影剂摄入总量的60%;肾脏在200min内排泄了造影剂摄入总量的28%左右,200min后,肾排泄进入平稳期,200-600 min内排泄了摄入总量的5%;600min内肝脏排泄了造影剂摄入总量的30%左右。结论:1.NSMC-Mn大鼠体内药代动力学呈现三房室模型特征,符合相似细胞外液造影剂药代动力学特点;2.NSMC-Mn同时通过肝肾排泄,在600 min内肝肾排泄约60%,肝肾各半。
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