野艾蒿挥发油的提取工艺及抗氧化作用研究

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野艾蒿在我国分布广泛,资源丰富,其植株可入药,性温,味苦、辛,归肝、肾经,有回阳、理气、消肿、化湿等功效,临床上常用于炎症、头痛、疟疾等疾病的治疗。野艾蒿含有多种化学成分,主要包括黄酮类、挥发油类、三萜类、多糖及一些小分子成分。挥发油是野艾蒿的主要有效成分之一。研究表明,挥发油在抗菌、抗肿瘤、抗氧化等方面具有很好的应用价值。目前野艾蒿挥发油在医药化工、食品保健等方面的研究应用已经备受国内学者的关注,虽然国内对艾蒿的研究已有较多的资料,但对野艾蒿的研究资料还比较缺乏,且已有的资料大多集中在野艾蒿挥发油的提取工艺方面,而在其活性成分及其作用研究方面还鲜有报道。因此,开展野艾蒿挥发油的制备,研究其活性成分及其作用,对促进野艾蒿资源的开发利用具有重要意义。本文围绕野艾蒿挥发油的提取、成分分析,以及抗氧化作用研究,取得的主要结果如下:(1)采用水蒸气蒸馏法对野艾蒿中的挥发油进行提取。以挥发油得率为指标,通过单因素实验和正交实验确定了野艾蒿挥发油的最佳提取工艺为:提取时间为6 h、料液比为1:12、浸泡时间为2.5 h,在此条件下野艾蒿挥发油得率为1.00%。(2)采用气相色谱-质谱法对野艾蒿挥发油进行成分检测,检测结果与艾蒿挥发油进行比对。结果,从野艾蒿挥发油中鉴定出了8种成分,主要为桉叶脑、酮、醇、烷类等。其中桉叶脑含量最高,为31.62%;二十四烷含量次之,为18.73%。从艾蒿挥发油中鉴定出了84种成分,主要为苯、萘、薁等环状化合物及酸、酰胺、酯、萜等化合物。其中[1R-(1.α,3a.β,4α,7β)]-1,2,3,4,5,6,7-四氢-1,4-二甲基-7-(1-甲基乙烯基)-薁的含量最高,为9.40%;(1S)-1,7,7-三甲基-双环[2.2.1]庚烷-2-酮的含量次之,为7.76%。通过比对发现,野艾蒿挥发油和艾蒿挥发油都含有桉叶脑、酮、醇、烷类等成分,但二者在主要成分的种类及含量方面均存在差异,这可能与植物的产地、生长环境及气候等因素的影响有关。(3)通过考察野艾蒿挥发油对羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力及野艾蒿挥发油的总还原力,对野艾蒿挥发油体外抗氧化作用进行了研究。结果表明:在0.1~4.0 mg/mL质量浓度范围内,野艾蒿挥发油随着质量浓度梯度的增加,具有较强的自由基清除能力及还原能力,体现出良好的抗氧化活性,野艾蒿挥发油对自由基的清除率与其质量浓度绘制的曲线呈良好的线性关系。(4)采用连续六周腹腔注射D-半乳糖的方法构建小鼠衰老模型,对不同实验组小鼠进行生理生化指标检测和组织形态学观察。结果表明:各剂量组小鼠的体重无显著性差异(p>0.05)。脏器系数测定方面,衰老模型组小鼠的心脏和肝脏系数显著下降(p<0.01,P<0.001),这可能与D-半乳糖对脏器的氧化损伤作用有关。生化指标检测方面,与空白对照组相比,衰老模型组小鼠心、肝、肾的SOD和GSH含量显著降低(p<0.05,p<0.01,p<0.001),MDA和PCO含量显著升高(p<0.001),说明小鼠衰老模型构建成功;与衰老模型组小鼠相比,野艾蒿挥发油保护组小鼠的心、肝、肾的SOD和GSH含量显著升高(p<0.05,p<0.01,p<0.001),MDA和PCO含量显著降低(p<0.05,p<0.01,p<0.001),说明野艾蒿挥发油对小鼠具有一定的体内抗氧化作用。通过组织形态学观察,野艾蒿挥发油可以很好的保护小鼠心肌细胞、肝细胞及肾脏细胞形态结构的完整性。
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