Shank相关RH结构域相互作用蛋白（SHARPIN）是一种线性泛素链相关蛋白,在身体的多种组织和器官中表达,并参与了 NF-κB和JNK等信号通路。近期较多研究发现SHARPIN与多种肿瘤如肾癌、肝癌、前列腺癌、骨肉瘤、乳腺癌等的发生和发展有关联,通过细胞增殖、凋亡、器官发育、免疫、炎性反应等功能起重要作用,这就提示SHARPIN是一种肿瘤相关促进或抑制基因。目前尚无从组织蛋白水平研究不同组织恶性肿瘤中SHARPIN的表达情况,本课题拟对不同组织来源恶性肿瘤中SHARPIN的表达进行研究并深入探索其参与基底细胞癌的发生发展。研究目的1.明确SHARPIN在多种组织恶性肿瘤中的表达;2.评估SHARPIN在多种恶性肿瘤中的亚细胞定位情况;3.深入探索SHARPIN在皮肤基底细胞癌中的作用机制。研究内容和方法1.样本收集总共收集了 11种不同组织来源的恶性肿瘤,包括肝内胆管细胞癌（ICC）,肝细胞癌（HCC）,肺癌,食道癌,喉癌和胰腺癌,乳腺癌,子宫内膜癌和嫌色性肾细胞癌（CRCC）,基底细胞癌（BCC）,鳞状细胞癌（SCC）,以及相应上述肿瘤组织对应的正常组织。2.SHARPIN在不同组织恶性肿瘤中的表达变化研究该部分采用免疫组化实验技术,检测SHARPIN蛋白分别在各种组织来源恶性肿瘤和其正常组织中的表达情况,使用H score评分对每个肿瘤样本和相应的正常组织进行半定量分析,并进行统计学分析。3.SHARPIN在不同组织恶性肿瘤中的亚细胞定位情况研究采用免疫荧光技术检测SHARPIN在不同组织来源恶性肿瘤中的定位情况;4.探索SHARPIN在皮肤基底细胞癌中的作用机制收集BCC的相关临床资料分析SHARPIN表达变化与年龄、性别、病理分型之间的关系,并行细胞周期实验,明确细胞周期情况,并检测相关蛋白表达情况。实验结果1.SHARPIN表达变化与不同组织来源恶性肿瘤的相关性研究1.1 SHARPIN表达升高的恶性肿瘤:1)SHARPIN在ICC、HCC、肺癌、食道癌、喉癌、胰腺癌、乳腺癌、CRCC、子宫内膜癌9种组织来源的恶性肿瘤较相应正常组织均表现出表达升高;2)SHARPIN在皮肤BCC、SCC中显示出表达降低。1.2 SHARPIN在不同组织来源恶性肿瘤中的亚细胞定位情况在ICC、HCC、喉癌、胰腺癌、子宫内膜癌、CRCC、SCC中,SHARPIN主要在细胞质中表达而在细胞核中不表达或仅显示微弱信号;在肺癌和食道癌,SHARPIN主要在细胞核中表达,在细胞质中仅显示弱或无信号。SHARPIN在细胞质和细胞核中均表达但主要在细胞质中表达的恶性肿瘤包括乳腺癌和BCC。2.SHARPIN在皮肤基底细胞癌的作用机制研究SHARPIN在BCC中的表达在不同年龄段、不同性别和不同病理分型之间的表达无明显差异;SHARPIN沉默后BCC细胞周期中的S期细胞明显增多,Cyclin D1和CDK4表达升高,p-c-JUN表达升高,GLI2表达也升高,PTCH1和PTCH2表达降低。结论1.SHARPIN的表达在非皮肤来源的ICC、HCC、肺癌、食道癌、喉癌、胰腺癌、乳腺癌、CRCC、子宫内膜癌9种恶性肿瘤中上调,而在非黑色素性皮肤肿瘤（non-melanoma skin cancer,NMSC）中下调,表明 SHARPIN 在源自不同组织来源的恶性肿瘤中可能起癌基因或抑癌基因作用。本研究募集的恶性肿瘤中,SHARPIN也主要定位于细胞质中,在细胞核中没有或只有微弱的表达;肺癌和食道癌除外,其恶性细胞具有异常大的细胞核且基本没有细胞质,因此,SHARPIN表达于细胞核中,在细胞质中无表达。推测SHARPIN主要在细胞质中起作用。2.SHARPIN在BCC中的表达不受年龄段、性别和病理分型的影响;SHARPIN低表达激活GLI2,抑制PTCH1和PTCH2表达,促进c-JUN磷酸化,促使Cyclin D1和CDK4高表达,导致BCC的S期细胞比例增多,加快BCC细胞增殖。